hCMEC/D3

يمثل خط خلايا HCMEC/D3 خط خلايا بطانة الأوعية الدموية الدماغية الدقيقة البشرية غير الخالدة التي تُستخدم على نطاق واسع في دراسة الحاجز الدموي الدماغي (BBB). تم توليد هذا الخط الخلوي من خلال نقل الخلايا البطانية الوعائية الدماغية الدقيقة البشرية الأولية بناقل فيروسي لامع يعبر عن ناقل التيلوميراز العكسي البشري (hTERT)، وهو إنزيم مهم للحفاظ على طول التيلومير وبالتالي تعزيز طول العمر الخلوي دون تحويل النمط الظاهري للخلية. ويساعد إدخال إنزيم hTERT هذه الخلايا على تجاوز الشيخوخة التكاثرية التي تحد من عمر الخلايا الأولية، مما يسمح بالتكاثر المستدام في المزرعة.

تحتفظ خلايا HCMEC/D3 بالخصائص الفسيولوجية والمورفولوجية الرئيسية للخلايا البطانية الدماغية الأولية، مما يجعلها نموذجاً قيماً للدراسات المختبرية للحاجز البربري المثقوب. وتشمل هذه الخصائص التعبير عن بروتينات الوصلات الضيقة مثل كلودين-5 وأوكلودين وزونولا أوكلودينز-1، والتي تعتبر حاسمة للحفاظ على سلامة الحاجز. كما تعبر الخلايا أيضاً عن العديد من الناقلات والمستقبلات النموذجية للبطانة الدماغية، مما يدعم استخدامها في الدراسات المتعلقة بتوصيل الأدوية والاضطرابات العصبية الوعائية. تؤكد قدرة HCMEC/D3 على تشكيل طبقة أحادية محكمة ذات مقاومة كهربائية عالية على ملاءمتها لمقايسات نفاذية الحاجز العصبي الوعائي الدماغي.

وقد غطت الأبحاث التي تستخدم خلايا HCMEC/D3 مجموعة واسعة من التطبيقات، بما في ذلك التحقيق في الأمراض الدماغية مثل السكتة الدماغية والتصلب المتعدد وانتقال السرطان إلى الدماغ. كما أن توافقها مع مختلف تقنيات البيولوجيا الجزيئية يجعلها أداة ممتازة لدراسة استجابات الخلايا البطانية للمحفزات الالتهابية وإجهاد القص والمواد السامة العصبية. يوفر هذا الخط الخلوي منصة قوية وقابلة للتكرار لتشريح الأحداث الجزيئية على مستوى البطانة الدماغية، مما يساهم في تقديم رؤى قيمة في تعقيدات صحة الأوعية الدموية العصبية ومرضها.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان