hCMEC/D3

Bunková línia HCMEC/D3 predstavuje imortalizovanú líniu ľudských mozgových mikrovaskulárnych endotelových buniek, ktorá sa vo veľkej miere využíva pri štúdiu hematoencefalickej bariéry (BBB). Táto bunková línia bola vytvorená transdukciou primárnych ľudských cerebrálnych mikrovaskulárnych endotelových buniek lentivírusovým vektorom exprimujúcim ľudskú telomerázovú reverznú transkriptázu (hTERT), ktorá je kľúčovým enzýmom na udržanie dĺžky telomér, a tým podporuje bunkovú dlhovekosť bez transformácie bunkového fenotypu. Zavedenie hTERT pomáha týmto bunkám obísť replikačnú senescenciu, ktorá obmedzuje životnosť primárnych buniek, a umožňuje ich trvalé rozmnožovanie v kultúre.

Bunky HCMEC/D3 si zachovávajú kľúčové fyziologické a morfologické vlastnosti primárnych mozgových endotelových buniek, čo z nich robí cenný model pre in vitro štúdie BBB. Patrí medzi ne expresia proteínov tesného spojenia, ako sú klaudín-5, okludín a zonula occludens-1, ktoré sú rozhodujúce pre udržanie integrity bariéry. Bunky tiež exprimujú rôzne transportéry a receptory typické pre mozgový endotel, čo podporuje ich použitie v štúdiách týkajúcich sa dodávania liekov a neurovaskulárnych porúch. Schopnosť HCMEC/D3 vytvárať tesnú monovrstvu s vysokým elektrickým odporom zdôrazňuje ich vhodnosť na skúšky priepustnosti BBB.

Výskum využívajúci bunky HCMEC/D3 zahŕňa širokú škálu aplikácií vrátane skúmania mozgových patológií, ako je mozgová príhoda, skleróza multiplex a metastázy rakoviny do mozgu. Ich kompatibilita s rôznymi technikami molekulárnej biológie z nich tiež robí vynikajúci nástroj na štúdium reakcií endotelových buniek na zápalové podnety, strihový stres a neurotoxické látky. Táto bunková línia poskytuje robustnú, reprodukovateľnú platformu na rozbor molekulárnych udalostí na úrovni mozgového endotelu, čím prispieva k cenným poznatkom o zložitosti neurovaskulárneho zdravia a ochorení.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke