hCMEC/D3

เซลล์ไลน์ HCMEC/D3 เป็นเซลล์ไลน์ของเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือดขนาดเล็กในสมองของมนุษย์ที่ถูกทำให้เป็นอมตะ ซึ่งถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษาเกี่ยวกับอุปสรรคเลือด-สมอง (BBB) เซลล์ไลน์นี้ถูกสร้างขึ้นโดยการถ่ายโอนเซลล์เยื่อบุผนังหลอดเลือดขนาดเล็กในสมองของมนุษย์จากเซลล์ต้นกำเนิดผ่านเวกเตอร์เลนทิไวรัสที่แสดงเอนไซม์เทโลเมอเรสย้อนกลับของมนุษย์ (hTERT) ซึ่งเป็นเอนไซม์สำคัญในการรักษาความยาวของเทโลเมียร์และส่งเสริมอายุเซลล์ที่ยาวนานขึ้นโดยไม่เปลี่ยนแปลงลักษณะของเซลล์การนำ hTERT เข้ามาช่วยเซลล์เหล่านี้ให้สามารถหลีกเลี่ยงการแก่ชราจากการจำลองตัวเองซึ่งจำกัดอายุการใช้งานของเซลล์ต้นกำเนิด ทำให้สามารถแพร่กระจายอย่างต่อเนื่องในวัฒนธรรมได้

เซลล์ HCMEC/D3 ยังคงลักษณะทางสรีรวิทยาและสัณฐานวิทยาที่สำคัญของเซลล์เยื่อบุผิวสมองปฐมภูมิ ทำให้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาในหลอดทดลองของ BBB ซึ่งรวมถึงการแสดงออกของโปรตีนที่เชื่อมต่ออย่างแน่นหนา เช่น claudin-5, occludin, และ zonula occludens-1 ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการรักษาความสมบูรณ์ของอุปสรรคเซลล์เหล่านี้ยังแสดงตัวขนส่งและตัวรับต่างๆ ที่เป็นลักษณะเฉพาะของเยื่อบุผนังหลอดเลือดสมอง ซึ่งสนับสนุนการใช้งานในการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับการนำส่งยาและความผิดปกติของระบบประสาทและหลอดเลือด ความสามารถของ HCMEC/D3 ในการสร้างชั้นเดียวที่แน่นหนาพร้อมความต้านทานทางไฟฟ้าสูง เน้นย้ำถึงความเหมาะสมในการใช้สำหรับการทดสอบการซึมผ่านของ BBB

งานวิจัยที่ใช้เซลล์ HCMEC/D3 ได้ครอบคลุมการประยุกต์ใช้ในหลากหลายด้าน รวมถึงการศึกษาพยาธิสภาพของสมอง เช่น โรคหลอดเลือดสมอง โรคปลอกประสาทเสื่อมแข็ง และการแพร่กระจายของมะเร็งไปยังสมอง ความเข้ากันได้กับเทคนิคชีววิทยาโมเลกุลต่างๆ ยังทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นเครื่องมือที่ยอดเยี่ยมในการศึกษาการตอบสนองของเซลล์บุผนังหลอดเลือดต่อสิ่งกระตุ้นการอักเสบ แรงเฉือน และสารพิษต่อระบบประสาทสายเซลล์นี้ให้แพลตฟอร์มที่แข็งแกร่งและสามารถทำซ้ำได้สำหรับการแยกแยะเหตุการณ์ระดับโมเลกุลที่ระดับเยื่อบุหลอดเลือดสมอง ซึ่งช่วยเพิ่มพูนความเข้าใจที่มีคุณค่าเกี่ยวกับความซับซ้อนของสุขภาพและโรคของระบบประสาทหลอดเลือด

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.