hCMEC/D3

HCMEC/D3-cellinjen representerar en odödliggjord human cerebral mikrovaskulär endotelcellinje, som används i stor utsträckning vid studier av blod-hjärnbarriären (BBB). Denna cellinje genererades genom transduktion av primära mänskliga cerebrala mikrovaskulära endotelceller med en lentiviral vektor som uttrycker humant telomeras omvänt transkriptas (hTERT), ett viktigt enzym för att bibehålla telomerlängden och därigenom främja cellens livslängd utan att förändra cellens fenotyp. Introduktionen av hTERT hjälper dessa celler att kringgå den replikativa senescens som begränsar livslängden hos primära celler, vilket möjliggör en långvarig förökning i odling.

HCMEC/D3-cellerna bibehåller viktiga fysiologiska och morfologiska egenskaper hos primära cerebrala endotelceller, vilket gör dem till en värdefull modell för in vitro-studier av BBB. Dessa inkluderar uttryck av tight junction-proteiner som claudin-5, occludin och zonula occludens-1, som är avgörande för att upprätthålla barriärens integritet. Cellerna uttrycker också olika transportörer och receptorer som är typiska för det cerebrala endotelet, vilket stöder deras användning i studier relaterade till läkemedelstillförsel och neurovaskulära störningar. HCMEC/D3:s förmåga att bilda ett tätt monolager med hög elektrisk resistans understryker deras lämplighet för BBB-permeabilitetsanalyser.

Forskning med HCMEC/D3-celler har omfattat ett brett spektrum av tillämpningar, inklusive undersökning av cerebrala patologier som stroke, multipel skleros och metastasering av cancer till hjärnan. Deras kompatibilitet med olika molekylärbiologiska tekniker gör dem också till ett utmärkt verktyg för att studera endotelcellers svar på inflammatoriska stimuli, skjuvstress och neurotoxiska ämnen. Denna cellinje utgör en robust, reproducerbar plattform för dissekering av molekylära händelser på cerebral endotelial nivå, vilket bidrar med värdefulla insikter om komplexiteten i neurovaskulär hälsa och sjukdom.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring