hCMEC/D3

Клітинна лінія HCMEC/D3 являє собою імморталізовану лінію ендотеліальних клітин мікросудин головного мозку людини, яка широко використовується у вивченні гематоенцефалічного бар'єру (ГЕБ). Ця клітинна лінія була отримана шляхом трансдукції первинних клітин ендотелію мікросудин головного мозку людини лентивірусним вектором, що експресує зворотну транскриптазу теломерази людини (hTERT), важливий фермент для підтримання довжини теломер і, таким чином, сприяє довголіттю клітин без трансформації фенотипу клітин. Введення hTERT допомагає цим клітинам уникнути реплікативного старіння, яке обмежує тривалість життя первинних клітин, забезпечуючи їхнє тривале розмноження в культурі.

Клітини HCMEC/D3 зберігають ключові фізіологічні та морфологічні характеристики первинних ендотеліальних клітин головного мозку, що робить їх цінною моделлю для дослідження ВВБ in vitro. До них відноситься експресія білків щільних з'єднань, таких як claudin-5, occludin і zonula occludens-1, які є критично важливими для підтримання цілісності бар'єру. Клітини також експресують різні транспортери і рецептори, характерні для церебрального ендотелію, що підтримує їх використання в дослідженнях, пов'язаних з доставкою ліків і нервово-судинними розладами. Здатність HCMEC/D3 утворювати щільний моношар з високим електричним опором підкреслює їх придатність для аналізу проникності ГЕБ.

Дослідження з використанням клітин HCMEC/D3 охоплюють широкий спектр застосувань, включаючи вивчення церебральних патологій, таких як інсульт, розсіяний склероз і метастазування раку в мозок. Їх сумісність з різними методами молекулярної біології також робить їх чудовим інструментом для вивчення реакції ендотеліальних клітин на запальні стимули, напругу зсуву і нейротоксичні речовини. Ця клітинна лінія забезпечує надійну, відтворювану платформу для вивчення молекулярних подій на рівні ендотелію головного мозку, сприяючи цінному розумінню складнощів здоров'я і хвороби нервово-судинної системи.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>