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hCMEC/D3
티슈
뇌, 측두엽, 혈액 미세혈관
질병
정상 뇌 미세혈관 내피세포 (hTERT 및 SV40에 의해 불멸화된; 혈액-뇌 장벽 모델; 종양 형성 능력이 없음)
전이 부위
해당 사항 없음 (정상 뇌 내피 세포주; 종양 검체가 아님)
동의어
HCMEC/D3, CMEC/D3, human Cortical Microvessels Endothelial Cells/D3

hCMEC/D3

Cell line · 제품 번호 305024

HCMEC/D3 세포주는 불멸화된 인간 뇌 미세혈관 내피 세포주로, 혈액-뇌 장벽 연구에 광범위하게 활용되고 있다...

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사용자 지정 / 추천 사항

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롯
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1

01일반 정보

설명

HCMEC/D3 세포주는 불멸화된 인간 뇌 미세혈관 내피 세포주로, 혈액-뇌 장벽(BBB) 연구에 광범위하게 활용되고 있습니다. 이 세포주는 텔로미어 길이를 유지하여 세포 표현형의 변형 없이 세포 수명을 촉진하는 데 중요한 효소인 인간 텔로머라제 역전사효소(hTERT)를 발현하는 렌티바이러스 벡터로 원시 인간 뇌 미세혈관 내피 세포를 형질 전환하여 생성된 세포주입니다. HTERT를 도입하면 이러한 세포가 원시 세포의 수명을 제한하는 복제 노화를 우회하여 배양에서 지속적인 증식을 할 수 있도록 도와줍니다.

HCMEC/D3 세포는 원발성 뇌내피세포의 주요 생리적 및 형태학적 특성을 유지하므로, BBB의 시험관 내 연구에 유용한 모델입니다. 여기에는 장벽 무결성을 유지하는 데 중요한 클라우딘-5, 오클루딘, 조눌라 오클루덴-1과 같은 타이트 접합 단백질의 발현이 포함됩니다. 또한 이 세포는 뇌 내피의 전형적인 다양한 수송체와 수용체를 발현하여 약물 전달 및 신경 혈관 장애와 관련된 연구에 활용될 수 있습니다. 높은 전기 저항을 가진 단단한 단층을 형성하는 HCMEC/D3의 능력은 BBB 투과성 분석에 대한 적합성을 강조합니다.

HCMEC/D3 세포를 활용한 연구는 뇌졸중, 다발성 경화증, 암의 뇌 전이와 같은 뇌 병리 조사를 포함하여 광범위한 응용 분야를 다루고 있습니다. 또한 다양한 분자생물학 기법과의 호환성으로 인해 염증 자극, 전단 응력, 신경 독성 물질에 대한 내피 세포 반응을 연구하는 데 탁월한 도구로 활용되고 있습니다. 이 세포주는 대뇌 내피 수준에서 일어나는 분자적 사건을 해부하기 위한 강력하고 재현 가능한 플랫폼을 제공하여 신경혈관 건강 및 질병의 복잡성에 대한 귀중한 통찰력을 제공합니다.

티슈
뇌, 측두엽, 혈액 미세혈관
질병
정상 뇌 미세혈관 내피세포 (hTERT 및 SV40에 의해 불멸화된; 혈액-뇌 장벽 모델; 종양 형성 능력이 없음)
전이 부위
해당 사항 없음 (정상 뇌 내피 세포주; 종양 검체가 아님)
응용 분야
혈뇌장벽(BBB) 연구; 신경염증; 중추신경계(CNS)로의 약물 전달 및 투과성; 내피세포를 통한 이동; 밀착접합 생물학(클라우딘-5, 오클루딘, ZO-1); 신경계 질환 모델링; 전단 응력 반응; 신경독성 시험
동의어
  • HCMEC/D3
  • CMEC/D3
  • human Cortical Microvessels Endothelial Cells/D3

02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
유전자 변형 여부
GMO-S1
유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
GMO-S1: This human microvascular endothelial cell line (hCMEC/D3) contains lentiviral constructs encoding SV40 T-Antigen or hTERT, supporting stable immortalization. The insert is integrated into primary endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
생물안전 등급
1

03특징

형태학
내피세포 유사형 (자갈돌 모양)
세포 유형
내피 세포
배가 시간
약 24~36시간

04식별자

인용
hCMEC/D3(사이티온 카탈로그 번호 305024)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_U985

05발현 및 감수성

바이러스
형질 전환: 시미안 바이러스 40(SV40)

06취급 및 배양

배지
EGM -2 MV 미세혈관내피세포 성장 배지-2 BulletKit(Lonza, Lonza 카탈로그 번호 CC-3202)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
제조업체에서 권장하는 대로 제공된 EBM-2 기초 배지를 보충합니다
분리 시약
Accutase 또는 0.25% 트립신-EDTA (간단히 처리; 트립신 처리를 과도하게 하지 말 것)
재배양
배지를 제거하고, Ca²⁺/Mg²⁺가 없는 PBS로 세척한 후, Accutase를 첨가하여 (37°C에서 3–5분간 처리), 완전 배지로 중화시킨 후, 300×g에서 5분간 원심분리하고, 콜라겐으로 코팅된 플라스크에 1–2 × 10⁴ 세포/cm²의 밀도로 재배양한다.
분할 비율
1~3
파종 밀도
1~2 × 10⁴ 세포/cm² (콜라겐 I로 코팅된 표면에서)
유체 교체
1~2일마다
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로 50% 기저 배지 + 40% FBS + 10% DMSO 또는 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제를 포함하는 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
성인
민족
지정되지 않음