hCMEC/D3

HCMEC/D3 rakuliin kujutab endast immortaliseeritud inimese aju mikrovaskulaarse endoteeli rakuliini, mida kasutatakse laialdaselt vere-aju barjääri (BBB) uurimisel. See rakuliin on loodud inimese primaarsete aju mikrovaskulaarsete endoteelirakkude transdutseerimise teel lentiviirusvektoriga, mis ekspresseerib inimese telomeraasi pöördtranskriptaasi (hTERT), mis on oluline ensüüm telomeeri pikkuse säilitamiseks ja seeläbi rakkude pikaealisuse edendamiseks, ilma et raku fenotüüp muutuks. HTERT lisamine aitab neil rakkudel vältida replikatiivset vananemist, mis piirab primaarsete rakkude eluiga, võimaldades püsivat paljunemist kultuuris.

HCMEC/D3 rakud säilitavad primaarsete aju endoteelirakkude peamised füsioloogilised ja morfoloogilised omadused, mis teeb neist väärtusliku mudeli BBB in vitro uuringuteks. Nende hulka kuulub tiheda ühenduskoha valkude, nagu claudin-5, occludin ja zonula occludens-1, ekspressioon, mis on kriitilise tähtsusega barjääri terviklikkuse säilitamiseks. Samuti ekspresseerivad rakud erinevaid aju endoteelile iseloomulikke transportereid ja retseptoreid, mis toetab nende kasutamist ravimite manustamise ja neurovaskulaarsete häiretega seotud uuringutes. HCMEC/D3 võime moodustada tihedat monokihti suure elektritakistusega rõhutab nende sobivust BBB läbilaskvusuuringuteks.

HCMEC/D3 rakke kasutavad teadusuuringud on hõlmanud mitmesuguseid rakendusi, sealhulgas ajupatoloogiate, nagu insult, hulgiskleroos ja vähi metastaaside teke ajus, uurimine. Nende ühilduvus erinevate molekulaarbioloogiliste meetoditega teeb neist ka suurepärase vahendi endoteelirakkude vastuste uurimiseks põletikulistele stiimulitele, nihkestressile ja neurotoksilistele ainetele. See rakuliin pakub usaldusväärset ja korratavat platvormi molekulaarsete sündmuste uurimiseks aju endoteeli tasandil, andes väärtuslikke teadmisi neurovaskulaarse tervise ja haiguste keerukusest.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest