PK-15

إن خط الخلايا PK(15)، المشتق من PK-2A، وهو خط خلوي أنشئ في عام 1955 من كلية خنزير بالغ، مصاب بفيروس أورام الخنازير من النوع C (المعروف سابقاً باسم الفيروس العكسي الداخلي المنشأ للخنازير PERV)، والذي يصنف كعامل من المجموعة 2 من عوامل الخطورة. ويحتوي جينوم الخلية المضيفة على 62 نسخة من الجين *pol*، الذي يرمز إلى إنزيم النسخ العكسي وبروتينات أخرى.

في البداية، وُصفت جزيئات الفيروس التي ينتجها خط الخلايا PK(15) بأنها معيبة وغير معدية لمجموعة متنوعة من خطوط خلايا الثدييات، بما في ذلك خط الخلايا البشرية، مما أدى إلى تصنيفها كخط خلايا من مجموعة الخطر 1. ومع ذلك، أظهرت دراسات لاحقة أن الخلايا البشرية 293 يمكن أن تصاب بالعدوى بشكل منتج من خلال المادة الطافية الخالية من الخلايا من خلايا PK(15). أدت هذه النتيجة إلى إعادة تصنيف خط خلايا PK(15) من قبل اللجنة المركزية الألمانية للسلامة البيولوجية (ZKBS) في نوفمبر 2018.

كشفت تحاليل تفاعل البوليميراز المتسلسل PCR أن الفيروسات المنقولة تنتمي إلى النوعين الفرعيين متعددي الموجهات PERV-A و PERV-B. وبالإضافة إلى ذلك، لوحظ أن جزيئات الفيروس التي أنتجتها 293 خلية كانت مقاومة للتعطيل بواسطة نظام المكملات البشرية.

وبالإضافة إلى أهميته الفيروسية، يعمل خط الخلايا PK(15) أيضًا كمضيف مناسب لتطبيقات نقل العدوى. ونظرًا لخصائص نموها الملتصقة، فهي ذات قيمة عالية في مختلف البيئات البحثية والتجريبية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان