PK-15

PK(15)-solulinja, joka on johdettu PK-2A-solulinjasta, joka on vuonna 1955 aikuisen sian munuaisesta luotu solulinja, on saanut tartunnan sikojen C-tyypin onkoviruksesta (joka tunnettiin aiemmin nimellä sikojen endogeeninen retrovirus, PERV), joka on luokiteltu riskiryhmän 2 taudinaiheuttajaksi. Isäntäsolun genomissa on 62 kopiota *pol*-geenistä, joka koodaa käänteistranskriptaasia ja muita proteiineja.

Alun perin PK(15)-solulinjan tuottamat viruspartikkelit kuvattiin viallisiksi ja ei-infektiivisiksi useille nisäkässolulinjoille, mukaan lukien ihmisen solulinja, minkä vuoksi se luokiteltiin riskiryhmän 1 solulinjaksi. Myöhemmät tutkimukset kuitenkin osoittivat, että ihmisen 293-solut voidaan infektoida tuottavasti PK(15)-solujen soluvapaalla supernatantilla. Tämä havainto johti siihen, että Saksan biologisen turvallisuuden keskuskomissio (ZKBS) luokitteli PK(15)-solulinjan uudelleen marraskuussa 2018.

PCR-analyysit osoittivat, että lähetetyt virukset kuuluivat polytrooppisiin alatyyppeihin PERV-A ja PERV-B. Lisäksi havaittiin, että 293-solujen tuottamat viruspartikkelit olivat resistenttejä inaktivoitumaan ihmisen komplementtijärjestelmällä.

Virologisen merkityksensä lisäksi PK(15)-solulinja toimii myös sopivana isäntänä transfektiosovelluksiin. Tarttuvien kasvuominaisuuksiensa ansiosta se on erittäin arvokas erilaisissa tutkimus- ja koeasetelmissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa