PK-15

Ląstelių linija PK(15), gauta iš 1955 m. iš suaugusios kiaulės inkstų sukurtos ląstelių linijos PK-2A, yra užkrėsta kiaulių C tipo onkovirusu (anksčiau vadintu kiaulių endogeniniu retrovirusu, PERV), kuris priskiriamas 2 rizikos grupei. Ląstelės šeimininkės genome yra 62 kopijos *pol* geno, kuris koduoja atvirkštinę transkriptazę ir kitus baltymus.

Iš pradžių buvo aprašyta, kad PK(15) ląstelių linijos sukurtos viruso dalelės yra defektinės ir neužkrečiamos įvairioms žinduolių ląstelių linijoms, įskaitant žmogaus ląstelių liniją, todėl ji buvo priskirta 1 rizikos grupės ląstelių linijai. Tačiau vėlesni tyrimai parodė, kad žmogaus 293 ląsteles galima produktyviai užkrėsti PK(15) ląstelių supernatantu be ląstelių. Dėl šios išvados Vokietijos centrinė biologinės saugos komisija (ZKBS) 2018 m. lapkričio mėn. perklasifikavo PK(15) ląstelių liniją.

Atlikus PGR analizę paaiškėjo, kad perduoti virusai priklausė politropiniams PERV-A ir PERV-B potipiams. Be to, pastebėta, kad 293 ląstelių pagamintos viruso dalelės buvo atsparios žmogaus komplemento sistemos inaktyvacijai.

PK(15) ląstelių linija turi ne tik virusologinę reikšmę, bet ir yra tinkamas šeimininkas transfekcijai atlikti. Dėl savo adherentinio augimo savybių ji yra labai vertinga įvairiose mokslinių tyrimų ir eksperimentinėse aplinkose.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime