PK-15

Dòng tế bào PK(15), được phân lập từ dòng tế bào PK-2A (được thiết lập vào năm 1955 từ thận của một con lợn trưởng thành), bị nhiễm virus oncovirus loại C của lợn (trước đây được gọi là virus retrovirus nội sinh của lợn, PERV), được phân loại là tác nhân nhóm nguy cơ 2. Genome của tế bào chủ chứa 62 bản sao của gen *pol*, mã hóa cho enzyme reverse transcriptase và các protein khác.

Ban đầu, các hạt virus được sản xuất bởi dòng tế bào PK(15) được mô tả là bị khiếm khuyết và không lây nhiễm đối với nhiều dòng tế bào động vật có vú, bao gồm cả dòng tế bào người, dẫn đến việc phân loại nó là dòng tế bào nhóm nguy cơ 1. Tuy nhiên, các nghiên cứu sau đó đã chứng minh rằng các tế bào người 293 có thể bị nhiễm trùng một cách hiệu quả bởi dịch siêu vi không tế bào của các tế bào PK(15). Phát hiện này đã dẫn đến việc tái phân loại dòng tế bào PK(15) bởi Ủy ban Trung ương về An toàn Sinh học của Đức (ZKBS) vào tháng 11 năm 2018.

Phân tích PCR cho thấy các virus được truyền thuộc các phân nhóm đa hình PERV-A và PERV-B. Ngoài ra, người ta quan sát thấy các hạt virus do tế bào 293 sản xuất có khả năng kháng lại quá trình bất hoạt bởi hệ thống bổ thể của người.

Ngoài ý nghĩa vi sinh học, dòng tế bào PK(15) còn là vật chủ phù hợp cho các ứng dụng chuyển gen. Nhờ đặc tính phát triển bám dính, nó có giá trị cao trong nhiều môi trường nghiên cứu và thí nghiệm.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.