PK-15

Die PK(15)-Zelllinie, die von PK-2A abgeleitet ist, einer 1955 aus der Niere eines erwachsenen Schweins hergestellten Zelllinie, ist mit dem porzinen Onkovirus vom Typ C (früher bekannt als porzines endogenes Retrovirus, PERV) infiziert, das als Erreger der Risikogruppe 2 eingestuft ist. Das Genom der Wirtszelle enthält 62 Kopien des *pol*-Gens, das für die reverse Transkriptase und andere Proteine codiert.

Ursprünglich wurden die von der PK(15)-Zelllinie produzierten Viruspartikel als defekt und nicht infektiös für eine Vielzahl von Säugetierzelllinien, einschließlich einer menschlichen Zelllinie, beschrieben, was zu ihrer Einstufung als Zelllinie der Risikogruppe 1 führte. Spätere Studien zeigten jedoch, dass menschliche 293-Zellen durch den zellfreien Überstand von PK(15)-Zellen produktiv infiziert werden können. Dieser Befund führte im November 2018 zu einer Neueinstufung der PK(15)-Zelllinie durch die Zentrale Kommission für Biologische Sicherheit (ZKBS).

PCR-Analysen ergaben, dass die übertragenen Viren zu den polytropen Subtypen PERV-A und PERV-B gehörten. Zudem wurde beobachtet, dass die von den 293-Zellen produzierten Viruspartikel resistent gegen die Inaktivierung durch das menschliche Komplementsystem waren.

Zusätzlich zu ihrer virologischen Bedeutung dient die PK(15)-Zelllinie auch als geeigneter Wirt für Transfektionsanwendungen. Aufgrund ihrer adhärenten Wachstumseigenschaften ist sie in verschiedenen Forschungs- und Versuchsumgebungen von großem Wert.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung