PK-15

PK(15) šūnu līnija, kas iegūta no PK-2A šūnu līnijas, kura izveidota 1955. gadā no pieaugušas cūkas nierēm, ir inficēta ar cūku C tipa onkovīrusu (agrāk pazīstams kā cūku endogēnais retrovīruss, PERV), kas klasificēts kā 2. riska grupas ierosinātājs. Saimnieka šūnas genoms satur 62 kopijas *pol* gēna, kas kodē reverso transkriptāzi un citas olbaltumvielas.

Sākotnēji PK(15) šūnu līnijas radītās vīrusa daļiņas tika aprakstītas kā bojātas un neinfekciozas dažādām zīdītāju šūnu līnijām, tostarp cilvēka šūnu līnijai, kā rezultātā tā tika klasificēta kā 1. riska grupas šūnu līnija. Tomēr turpmāki pētījumi parādīja, ka cilvēka 293 šūnas var produktīvi inficēt ar PK(15) šūnu bezšūnu supernatantu. Šī atklājuma rezultātā Vācijas Centrālā bioloģiskās drošības komisija (ZKBS) 2018. gada novembrī pārklasificēja PK(15) šūnu līniju.

PĶR analīzes atklāja, ka pārnestie vīrusi piederēja pie politropiskajiem PERV-A un PERV-B apakštipiem. Turklāt tika novērots, ka 293 šūnu producētās vīrusa daļiņas bija noturīgas pret inaktivāciju ar cilvēka komplementa sistēmu.

Papildus tās virusoloģiskajai nozīmei PK(15) šūnu līnija kalpo arī kā piemērots saimnieks transfekcijas lietojumiem. Pateicoties tās adherentās augšanas īpašībām, tā ir ļoti vērtīga dažādos pētījumos un eksperimentos.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu