PK-15

1955 yılında yetişkin bir domuzun böbreğinden elde edilen bir hücre hattı olan PK-2A'dan türetilen PK(15) hücre hattı, risk grubu 2 ajanı olarak sınıflandırılan domuz tip-C onkovirüsü (eski adıyla domuz endojen retrovirüsü, PERV) ile enfekte edilmiştir. Konak hücre genomu, ters transkriptaz ve diğer proteinleri kodlayan *pol* geninin 62 kopyasını içerir.

Başlangıçta, PK(15) hücre hattı tarafından üretilen virüs partikülleri, bir insan hücre hattı da dahil olmak üzere çeşitli memeli hücre hatları için kusurlu ve bulaşıcı olmayan olarak tanımlanmış ve risk grubu 1 hücre hattı olarak sınıflandırılmasına yol açmıştır. Ancak daha sonra yapılan çalışmalar, insan 293 hücrelerinin PK(15) hücrelerinin hücresiz süpernatantı tarafından verimli bir şekilde enfekte edilebileceğini göstermiştir. Bu bulgu, PK(15) hücre hattının Kasım 2018'de Alman Biyolojik Güvenlik Merkez Komisyonu (ZKBS) tarafından yeniden sınıflandırılmasıyla sonuçlanmıştır.

PCR analizleri, bulaşan virüslerin politropik alt tipler olan PERV-A ve PERV-B'ye ait olduğunu ortaya koymuştur. Ayrıca, 293 hücre tarafından üretilen virüs partiküllerinin insan kompleman sistemi tarafından inaktivasyona dirençli olduğu gözlemlenmiştir.

Virolojik öneminin yanı sıra, PK(15) hücre hattı transfeksiyon uygulamaları için de uygun bir konak olarak hizmet vermektedir. Yapışık büyüme özellikleri nedeniyle, çeşitli araştırma ve deneysel ortamlarda oldukça değerlidir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın