PK-15

A linha celular PK(15), derivada da PK-2A, uma linha celular estabelecida em 1955 a partir do rim de um porco adulto, está infetada com o oncovírus porcino tipo C (anteriormente conhecido como retrovírus endógeno porcino, PERV), que está classificado como um agente do grupo de risco 2. O genoma da célula hospedeira contém 62 cópias do gene *pol*, que codifica a transcriptase reversa e outras proteínas.

Inicialmente, as partículas de vírus produzidas pela linha celular PK(15) foram descritas como defeituosas e não infecciosas para uma variedade de linhas celulares de mamíferos, incluindo uma linha celular humana, o que levou à sua classificação como linha celular do grupo de risco 1. No entanto, estudos posteriores demonstraram que as células humanas 293 podiam ser infectadas de forma produtiva pelo sobrenadante livre de células PK(15). Esta descoberta resultou na reclassificação da linha celular PK(15) pela Comissão Central Alemã de Segurança Biológica (ZKBS) em novembro de 2018.

As análises de PCR revelaram que os vírus transmitidos pertenciam aos subtipos politrópicos PERV-A e PERV-B. Além disso, observou-se que as partículas de vírus produzidas pelas células 293 eram resistentes à inativação pelo sistema de complemento humano.

Para além da sua importância virológica, a linha de células PK(15) também serve como um hospedeiro adequado para aplicações de transfecção. Devido às suas propriedades de crescimento aderente, é altamente valiosa em vários contextos de investigação e experimentação.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia