PK-15

De PK(15)-cellijn, afgeleid van PK-2A, een cellijn die in 1955 werd ontwikkeld uit de nier van een volwassen varken, is geïnfecteerd met het varkens type-C oncovirus (voorheen bekend als porcine endogenous retrovirus, PERV), dat geclassificeerd is als een risicogroep 2-agens. Het genoom van de gastheercel bevat 62 kopieën van het *pol*-gen, dat codeert voor reverse transcriptase en andere eiwitten.

Aanvankelijk werden de virusdeeltjes die geproduceerd werden door de PK(15)-cellijn beschreven als defect en niet-infectieus voor verschillende zoogdiercellijnen, waaronder een menselijke cellijn, wat leidde tot de classificatie als risicogroep 1-cellijn. Latere studies toonden echter aan dat menselijke 293 cellen productief geïnfecteerd konden worden door het celvrije supernatant van PK(15)-cellen. Deze bevinding resulteerde in de herclassificatie van de PK(15)-cellijn door de Duitse Centrale Commissie voor Biologische Veiligheid (ZKBS) in november 2018.

Uit PCR-analyses bleek dat de overgedragen virussen behoorden tot de polytropische subtypes PERV-A en PERV-B. Daarnaast werd waargenomen dat de virusdeeltjes geproduceerd door de 293 cellen resistent waren tegen inactivatie door het menselijke complementsysteem.

Naast zijn virologische betekenis is de PK(15)-cellijn ook een geschikte gastheer voor transfectietoepassingen. Vanwege de adherente groei-eigenschappen is het zeer waardevol in verschillende onderzoeks- en experimentele omgevingen.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring