PK-15

PK(15)-cellelinjen, som er avledet fra PK-2A, en cellelinje som ble etablert i 1955 fra nyrene til en voksen gris, er infisert med porcint onkovirus type C (tidligere kjent som porcint endogent retrovirus, PERV), som er klassifisert som et agens i risikogruppe 2. Vertscellens genom inneholder 62 kopier av *pol*-genet, som koder for revers transkriptase og andre proteiner.

Opprinnelig ble viruspartiklene produsert av PK(15)-cellelinjen beskrevet som defekte og ikke-infeksiøse for en rekke pattedyrcellelinjer, inkludert en human cellelinje, noe som førte til at den ble klassifisert som en risikogruppe 1-cellelinje. Senere studier viste imidlertid at humane 293-celler kunne infiseres produktivt av den cellefrie supernatanten fra PK(15)-celler. Dette funnet resulterte i at PK(15)-cellelinjen ble omklassifisert av den tyske sentralkommisjonen for biologisk sikkerhet (ZKBS) i november 2018.

PCR-analyser avslørte at de overførte virusene tilhørte de polytrope subtypene PERV-A og PERV-B. I tillegg ble det observert at viruspartiklene som ble produsert av 293-cellene, var motstandsdyktige mot inaktivering av det humane komplementsystemet.

I tillegg til sin virologiske betydning er PK(15)-cellelinjen også en egnet vert for transfeksjonsapplikasjoner. På grunn av sine adherente vekstegenskaper er den svært verdifull i ulike forsknings- og forsøksmiljøer.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring