PK-15

Bunková línia PK(15), odvodená od bunkovej línie PK-2A, ktorá bola vytvorená v roku 1955 z obličiek dospelých ošípaných, je infikovaná onkovírusom ošípaných typu C (predtým známym ako endogénny retrovírus ošípaných, PERV), ktorý je klasifikovaný ako pôvodca rizika skupiny 2. Genóm hostiteľskej bunky obsahuje 62 kópií génu *pol*, ktorý kóduje reverznú transkriptázu a ďalšie proteíny.

Pôvodne boli vírusové častice produkované bunkovou líniou PK(15) opísané ako defektné a neinfekčné pre rôzne bunkové línie cicavcov vrátane ľudskej bunkovej línie, čo viedlo k jej zaradeniu do rizikovej skupiny 1. Následné štúdie však preukázali, že ľudské bunky 293 môžu byť produktívne infikované bezbunkovým supernatantom buniek PK(15). Toto zistenie viedlo k tomu, že Nemecká ústredná komisia pre biologickú bezpečnosť (ZKBS) v novembri 2018 zmenila klasifikáciu bunkovej línie PK(15).

Analýzy PCR odhalili, že prenesené vírusy patrili k polytropným podtypom PERV-A a PERV-B. Okrem toho sa zistilo, že vírusové častice produkované bunkami 293 boli odolné voči inaktivácii ľudským komplementovým systémom.

Okrem svojho virologického významu slúži bunková línia PK(15) aj ako vhodný hostiteľ na transfekčné aplikácie. Vďaka svojim adherentným rastovým vlastnostiam je veľmi cenná v rôznych výskumných a experimentálnych podmienkach.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke