PK-15

Linia komórkowa PK(15), pochodząca z PK-2A, linii komórkowej utworzonej w 1955 r. z nerki dorosłej świni, jest zakażona onkowirusem świń typu C (wcześniej znanym jako endogenny retrowirus świń, PERV), który jest sklasyfikowany jako czynnik grupy ryzyka 2. Genom komórki gospodarza zawiera 62 kopie genu *pol*, który koduje odwrotną transkryptazę i inne białka.

Początkowo cząsteczki wirusa wytwarzane przez linię komórkową PK(15) zostały opisane jako wadliwe i niezakaźne dla różnych linii komórkowych ssaków, w tym ludzkiej linii komórkowej, co doprowadziło do sklasyfikowania jej jako linii komórkowej grupy ryzyka 1. Późniejsze badania wykazały jednak, że ludzkie komórki 293 mogą być produktywnie infekowane przez bezkomórkowy supernatant komórek PK(15). Odkrycie to doprowadziło do przeklasyfikowania linii komórkowej PK(15) przez niemiecką Centralną Komisję Bezpieczeństwa Biologicznego (ZKBS) w listopadzie 2018 roku.

Analizy PCR ujawniły, że przeniesione wirusy należały do podtypów politropowych PERV-A i PERV-B. Dodatkowo zaobserwowano, że cząsteczki wirusa produkowane przez komórki 293 były odporne na inaktywację przez ludzki układ dopełniacza.

Oprócz znaczenia wirusologicznego, linia komórkowa PK(15) służy również jako odpowiedni gospodarz do zastosowań transfekcyjnych. Ze względu na swoje właściwości wzrostu adherentnego jest bardzo cenna w różnych badaniach i warunkach eksperymentalnych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym