PK-15

Celična linija PK(15), ki izhaja iz celične linije PK-2A, ustvarjene leta 1955 iz ledvic odraslega prašiča, je okužena s prašičjim onkovirusom tipa C (prej znanim kot prašičji endogeni retrovirus, PERV), ki je uvrščen v skupino tveganja 2. Genom gostiteljske celice vsebuje 62 kopij gena *pol*, ki kodira reverzno transkriptazo in druge beljakovine.

Sprva so bili virusni delci, ki jih proizvaja celična linija PK(15), opisani kot okvarjeni in neinfektivni za različne celične linije sesalcev, vključno s človeško celično linijo, zaradi česar je bila ta celična linija uvrščena v skupino tveganja 1. Vendar so poznejše študije pokazale, da je mogoče človeške celice 293 produktivno okužiti z brezceličnim supernatantom celic PK(15). Zaradi te ugotovitve je nemška osrednja komisija za biološko varnost (ZKBS) novembra 2018 ponovno razvrstila celično linijo PK(15).

Analize PCR so pokazale, da so preneseni virusi pripadali politropnim podtipom PERV-A in PERV-B. Poleg tega je bilo ugotovljeno, da so bili virusni delci, ki so jih proizvedle celice 293, odporni na inaktivacijo s sistemom človeškega komplementa.

Poleg virološkega pomena je celična linija PK(15) tudi primeren gostitelj za aplikacije transfekcije. Zaradi svojih adherentnih lastnosti rasti je zelo dragocena v različnih raziskovalnih in eksperimentalnih okoljih.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo