PK-15

La línea celular PK(15), derivada de PK-2A, una línea celular establecida en 1955 a partir del riñón de un cerdo adulto, está infectada con el oncovirus porcino de tipo C (anteriormente conocido como retrovirus endógeno porcino, PERV), que está clasificado como agente del grupo de riesgo 2. El genoma de la célula huésped contiene 62 copias del gen *pol*, que codifica la transcriptasa inversa y otras proteínas.

Inicialmente, las partículas de virus producidas por la línea celular PK(15) se describieron como defectuosas y no infecciosas para una variedad de líneas celulares de mamíferos, incluyendo una línea celular humana, lo que llevó a su clasificación como línea celular del grupo de riesgo 1. Sin embargo, estudios posteriores demostraron que las células 293 humanas podían ser infectadas productivamente por el sobrenadante libre de células PK(15). Este hallazgo dio lugar a la reclasificación de la línea celular PK(15) por la Comisión Central Alemana de Seguridad Biológica (ZKBS) en noviembre de 2018.

Los análisis de PCR revelaron que los virus transmitidos pertenecían a los subtipos politrópicos PERV-A y PERV-B. Además, se observó que las partículas de virus producidas por las células 293 eran resistentes a la inactivación por el sistema del complemento humano.

Además de su importancia virológica, la línea celular PK(15) también sirve como huésped adecuado para aplicaciones de transfección. Debido a sus propiedades de crecimiento adherente, es muy valiosa en diversos entornos de investigación y experimentación.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía