PK-15

La linea cellulare PK(15), derivata dalla PK-2A, una linea cellulare creata nel 1955 dal rene di un maiale adulto, è infettata con l'oncovirus suino di tipo C (precedentemente noto come retrovirus endogeno suino, PERV), che è classificato come agente del gruppo di rischio 2. Il genoma della cellula ospite contiene 62 copie del gene *pol*, che codifica per la trascrittasi inversa e altre proteine.

Inizialmente, le particelle virali prodotte dalla linea cellulare PK(15) erano state descritte come difettose e non infettive per una serie di linee cellulari di mammifero, tra cui una linea cellulare umana, il che ha portato alla sua classificazione come linea cellulare del gruppo di rischio 1. Tuttavia, studi successivi hanno dimostrato che la linea cellulare PK(15) è in grado di funzionare con una linea cellulare umana 29(15). Tuttavia, studi successivi hanno dimostrato che le cellule umane 293 possono essere infettate in modo produttivo dal surnatante privo di cellule delle cellule PK(15). Questa scoperta ha portato alla riclassificazione della linea cellulare PK(15) da parte della Commissione centrale tedesca per la sicurezza biologica (ZKBS) nel novembre 2018.

Le analisi PCR hanno rivelato che i virus trasmessi appartenevano ai sottotipi politropici PERV-A e PERV-B. Inoltre, è stato osservato che le particelle virali prodotte dalle cellule 293 erano resistenti all'inattivazione da parte del sistema del complemento umano.

Oltre alla sua importanza virologica, la linea cellulare PK(15) funge anche da ospite adatto per applicazioni di trasfezione. Grazie alle sue proprietà di crescita aderente, è molto utile in vari contesti di ricerca e sperimentazione.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia