PK-15

Η κυτταρική σειρά PK(15), που προέρχεται από την PK-2A, μια κυτταρική σειρά που δημιουργήθηκε το 1955 από το νεφρό ενός ενήλικου χοίρου, έχει μολυνθεί με τον ογκοϊό των χοίρων τύπου C (παλαιότερα γνωστό ως ενδογενής ρετροϊός των χοίρων, PERV), ο οποίος ταξινομείται ως παράγοντας της ομάδας κινδύνου 2. Το γονιδίωμα του κυττάρου ξενιστή περιέχει 62 αντίγραφα του γονιδίου *pol*, το οποίο κωδικοποιεί την αντίστροφη μεταγραφάση και άλλες πρωτεΐνες.

Αρχικά, τα σωματίδια του ιού που παρήχθησαν από την κυτταρική σειρά PK(15) περιγράφηκαν ως ελαττωματικά και μη μολυσματικά για μια ποικιλία κυτταρικών σειρών θηλαστικών, συμπεριλαμβανομένης μιας ανθρώπινης κυτταρικής σειράς, γεγονός που οδήγησε στην ταξινόμησή της ως κυτταρικής σειράς ομάδας κινδύνου 1. Ωστόσο, μεταγενέστερες μελέτες έδειξαν ότι τα ανθρώπινα κύτταρα 293 μπορούσαν να μολυνθούν παραγωγικά από το υπερκείμενο χωρίς κύτταρα των κυττάρων PK(15). Η διαπίστωση αυτή είχε ως αποτέλεσμα την επαναταξινόμηση της κυτταρικής σειράς PK(15) από τη γερμανική Κεντρική Επιτροπή Βιολογικής Ασφάλειας (ZKBS) τον Νοέμβριο του 2018.

Οι αναλύσεις PCR αποκάλυψαν ότι οι μεταδιδόμενοι ιοί ανήκαν στους πολυτροπικούς υπότυπους PERV-A και PERV-B. Επιπλέον, παρατηρήθηκε ότι τα σωματίδια του ιού που παρήχθησαν από τα κύτταρα 293 ήταν ανθεκτικά στην αδρανοποίηση από το ανθρώπινο σύστημα συμπληρώματος.

Εκτός από την ιολογική της σημασία, η κυτταρική σειρά PK(15) χρησιμεύει επίσης ως κατάλληλος ξενιστής για εφαρμογές διαμόλυνσης. Λόγω των ιδιοτήτων προσκολλητικής ανάπτυξης που διαθέτει, είναι ιδιαίτερα πολύτιμη σε διάφορα ερευνητικά και πειραματικά περιβάλλοντα.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης