PK-15

PK(15)細胞株は、1955年に成豚の腎臓から樹立された細胞株であるPK-2Aに由来し、リスクグループ2に分類されるブタC型オンコウウイルス（以前はブタ内在性レトロウイルス、PERVとして知られていた）に感染している。宿主細胞のゲノムには逆転写酵素やその他のタンパク質をコードする*pol*遺伝子が62コピー含まれている。

当初、PK(15)細胞株によって産生されたウイルス粒子は、ヒト細胞株を含む様々な哺乳動物細胞株に対して欠陥があり非感染性であると報告され、リスクグループ1に分類された。しかし、その後の研究で、ヒト293細胞はPK(15)細胞の無細胞上清によって生産的に感染することが証明された。この発見により、2018年11月にドイツ生物学的安全性中央委員会（ZKBS）はPK(15)細胞株を再分類した。

PCR分析の結果、感染したウイルスは多型亜型のPERV-AおよびPERV-Bに属することが判明した。さらに、293細胞によって産生されたウイルス粒子は、ヒト補体系による不活化に対して耐性があることが観察された。

そのウイルス学的意義に加えて、PK(15)細胞株はトランスフェクションの応用に適した宿主としても役立つ。PK(15)細胞株は、その接着増殖特性により、様々な研究および実験環境において非常に有用である。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。