PK-15

Garis sel PK (15), yang berasal dari PK-2A, garis sel yang dibuat pada tahun 1955 dari ginjal babi dewasa, terinfeksi onkovirus tipe-C babi (sebelumnya dikenal sebagai retrovirus endogen babi, PERV), yang diklasifikasikan sebagai agen kelompok risiko 2. Genom sel inang mengandung 62 salinan gen *pol*, yang mengkode reverse transcriptase dan protein lainnya.

Awalnya, partikel virus yang diproduksi oleh garis sel PK (15) digambarkan sebagai cacat dan tidak menular untuk berbagai garis sel mamalia, termasuk garis sel manusia, yang mengarah pada klasifikasinya sebagai garis sel kelompok risiko 1. Namun, penelitian selanjutnya menunjukkan bahwa sel 293 manusia dapat terinfeksi secara produktif oleh supernatan bebas sel dari sel PK (15). Temuan ini menghasilkan klasifikasi ulang garis sel PK (15) oleh Komisi Pusat Keamanan Biologi Jerman (ZKBS) pada November 2018.

Analisis PCR mengungkapkan bahwa virus yang ditularkan termasuk dalam subtipe polytropik PERV-A dan PERV-B. Selain itu, diamati bahwa partikel virus yang diproduksi oleh 293 sel resisten terhadap inaktivasi oleh sistem komplemen manusia.

Selain signifikansi virologisnya, garis sel PK (15) juga berfungsi sebagai inang yang cocok untuk aplikasi transfeksi. Karena sifat pertumbuhannya yang patuh, ini sangat berharga dalam berbagai penelitian dan pengaturan eksperimental.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami