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PK-15
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PK(15), PK (15), PK 15, PK15, Porcine Kidney-15

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PK-15

Cell line · 제품 번호 607426

The PK(15) cell line, derived from PK-2A, a cell line established in 1955 from the kidney of an adult pig, is infected with the porcine type-C oncovirus (...

€430.00세금 및 배송비 별도

사용자 지정 / 추천 사항

재고 있음
롯
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1

01일반 정보

설명

1955년 성돈의 신장에서 확립된 세포주인 PK-2A에서 유래한 PK(15) 세포주는 위험군 2로 분류되는 돼지 C형 온코바이러스(이전의 돼지 내인성 레트로바이러스, PERV)에 감염되어 있습니다. 숙주 세포 게놈에는 역전사효소 및 기타 단백질을 코딩하는 *pol* 유전자의 62개 사본이 포함되어 있습니다.

처음에 PK(15) 세포주에서 생성된 바이러스 입자는 인간 세포주를 포함한 다양한 포유류 세포주에 대해 결함이 있고 감염력이 없는 것으로 설명되어 위험군 1 세포주로 분류되었습니다. 그러나 후속 연구에서 인간 293 세포가 PK(15) 세포의 무세포 상청액에 의해 생산적으로 감염될 수 있음이 입증되었습니다. 이 발견으로 인해 2018년 11월 독일 중앙 생물학적 안전위원회(ZKBS)는 PK(15) 세포주를 재분류했습니다.

PCR 분석 결과, 전염된 바이러스는 다형성 아형인 PERV-A와 PERV-B에 속하는 것으로 밝혀졌습니다. 또한 293 세포에서 생성된 바이러스 입자는 인간 보체 시스템에 의한 비활성화에 내성이 있는 것으로 관찰되었습니다.

PK(15) 세포주는 바이러스학적 중요성 외에도 감염 응용 분야에 적합한 숙주 역할을 합니다. 부착성 성장 특성으로 인해 다양한 연구 및 실험 환경에서 매우 유용합니다.

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  • PK(15)
  • PK (15)
  • PK 15
  • PK15
  • Porcine Kidney-15

02분류

생물체
돼지
성
남성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피 유사

04식별자

인용
PK-15(사이티온 카탈로그 번호 607426)
NCBI 세금 식별번호
9823
셀로사우루스
CVCL_2160

05발현 및 감수성

바이러스
PCV1(돼지 써코바이러스 1) 양성, PCV2 음성, PC3 음성
바이러스 감수성
돼지 콜레라, 아프리카 돼지 열병, 돼지 수포성 발진증, 구제역(FMDV), 수포성 구내염(인디애나), 백시니아, 레오바이러스 2, 3, 아데노바이러스 4, 5, 콕사키바이러스 B2, B3, B4, B5, B6, 콕사키바이러스 B2, B3, B4, B5, B6
바이러스 저항성
폴리오 바이러스 2
역전사효소
긍정적

06취급 및 배양

배지
EMEM(MEM 이글), w: 2mM L-글루타민, w: 2.2g/L NaHCO3, w: EBSS(사이티온 제품 번호 820100a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS와 1% NEAA를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
2 x 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
세포가 동결 과정에서 최소 24시간에서 48시간 동안 회복될 때까지 기다리세요.
해동 및 배양

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

품종 / 아종
햄프셔
기증자 연령
성인