
- Gewebe
- Lunge
- Krankheit
- Nicht-kleinzelliger Lungenkrebs
- Metastasenherd
- Maligner Pleuraerguss (Entnahmestelle)
- Synonyme
- HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366
Dokumente
HCC366
Cell line · Artikelnummer 302155
HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...
Anpassung / Empfehlungen
- HCC366Cell line€430.00
Empfohlen (frischeste Charge)
01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
HCC366 ist eine Zelllinie eines humanen adenosquamösen Lungenkarzinoms, die am Hamon Cancer Center des UT Southwestern Medical Center aus dem malignen Pleuraerguss einer 80-jährigen europäischen Patientin isoliert wurde. Das adenosquamöse Karzinom ist ein seltener gemischter histologischer Subtyp des nicht-kleinzelligen Lungenkarzinoms (NSCLC), der Merkmale sowohl des Adenokarzinoms als auch des Plattenepithelkarzinoms vereint. HCC366 ist in den Panels „Cancer Dependency Map“ (DepMap), CCLE, COSMIC-Zelllinien und dem MD Anderson Cell Lines Project enthalten. Die Zelllinie weist eine homozygote TP53-p.Tyr220Cys-Mutation (eine strukturelle Mutation der DNA-Bindungsdomäne) sowie eine heterozygote ATM-p.Pro534Ala-Mutation auf. Sie weist keine KRAS-, EGFR- oder STK11-Treibermutationen auf und zeigt Mikrosatellitenstabilität (MSS). Die Verdopplungszeit beträgt etwa 60–70 Stunden.
HCC366 eignet sich für die Forschung an nicht-kleinzelligem Lungenkarzinom (NSCLC), insbesondere für Studien zur Biologie des adenosquamösen Lungenkarzinoms, das im Vergleich zu den Subtypen des reinen Adenokarzinoms oder des Plattenepithelkarzinoms bislang noch unzureichend erforscht ist. Zu den wichtigsten Anwendungsbereichen gehören: Untersuchungen zu TP53-Gain-of-Function-Mutationen; die ATM-vermittelte DNA-Schadensantwort; Tests zur Chemotherapie-Empfindlichkeit und -Resistenz (Cisplatin, Paclitaxel, Gemcitabin); die Bewertung zielgerichteter Wirkstoffe; die Erstellung von Wirkstoffempfindlichkeitsprofilen im Rahmen der DepMap- und CCLE-Frameworks; die Entdeckung von Biomarkern für NSCLC mit gemischter Histologie; die vergleichende Genomik; sowie die Erstellung von Proteom- und Transkriptom-Profilen. HCC366 hat zudem zu Untersuchungen der Zellbiologie von Lungenkrebs beigetragen, darunter Proliferations-, Migrations- und Invasionsmechanismen, die für maligne Pleuraerkrankungen relevant sind.
- Gewebe
- Lunge
- Krankheit
- Nicht-kleinzelliger Lungenkrebs
- Metastasenherd
- Maligner Pleuraerguss (Entnahmestelle)
- Anwendungen
- Forschung zum nicht-kleinzelligen Lungenkarzinom (NSCLC); Biologie des adenosquamösen Lungenkarzinoms; Studien zur Funktionsgewinnmutation TP53 p.Tyr220Cys; ATM-DNA-Schadensantwort; Chemotherapie-Empfindlichkeit (Cisplatin, Paclitaxel, Gemcitabin); DepMap/CCLE-Profilierung der Arzneimittelsensitivität; Entdeckung von Biomarkern; vergleichende Genomik bei NSCLC; Biologie maligner Pleurenerkrankungen
- Synonyme
- HCC-366
- HCC0366
- Hamon Cancer Center 366
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Sex
- Weiblich
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- GVO-Status
- Ohne Gentechnik
- Angaben zum GVO-Status
- No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Epithelähnlich
- Zelltyp
- Epithelzellen
- MSI-Status
- MSS
- Verdopplungszeit
- ca. 60 bis 70 Stunden
04Bezeichner
- Quellenangabe
- HCC366 (Cytion Katalognummer 302155)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2059
05Expression und Anfälligkeit
- Mutationsprofil
- TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) homozygot; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) heterozygot
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% hitzeinaktiviertem FBS
- Dissoziationsreagenz
- Accutase
- Subkultivierung
- Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
- Split-Verhältnis
- 1 bis 5
- Aussaatdichte
- 1 bis 3 × 10⁴ Zellen/cm²
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Erholung nach dem Auftauen
- Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 × 10⁴ Zellen/cm² ausplattieren und vor dem ersten Mediumwechsel mindestens 24 Stunden für die Anhaftung einplanen.
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Alter des Spenders
- 80 Jahre
- Ethnische Zugehörigkeit
- Europäisch
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja