
- Vävnad
- Lungan
- Sjukdom
- Icke småcellig lungcancer
- Metastaseringsställe
- Malign pleuralvätska (provtagningsställe)
- Synonymer
- HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366
Dokument
HCC366
Cell line · Produktnummer 302155
HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...
Anpassning / Rekommendationer
- HCC366Cell line€430.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
HCC366 är en cellinje av humant adenoskvamöst lungkarcinom som etablerats från en malign pleuralvätskeansamling hos en 80-årig europeisk kvinnlig patient vid Hamon Cancer Center, UT Southwestern Medical Center. Adenoskvamöst karcinom är en sällsynt histologisk subtyp av icke-småcellig lungcancer (NSCLC) som kombinerar drag från både adenokarcinom och skivepitelcancer. HCC366 ingår i panelerna Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC-cellinjer och MD Anderson Cell Lines Project. Cellinjen bär en homozygot TP53 p.Tyr220Cys-mutation (en strukturell mutation i DNA-bindningsdomänen) och en heterozygot ATM p.Pro534Ala-mutation. Den bär inte på KRAS-, EGFR- eller STK11-drivarmutationer och uppvisar mikrosatellitstabilitet (MSS). Fördubblingstiden är cirka 60–70 timmar.
HCC366 är lämplig för forskning om icke-småcellig lungcancer (NSCLC), särskilt i studier av biologin hos adenoskvamöst lungkarcinom, som fortfarande är relativt lite undersökt jämfört med subtyperna rent adenokarcinom eller skvamöst cellkarcinom. Viktiga tillämpningar inkluderar: studier av TP53-mutationer med funktionsförstärkning; ATM-medierad DNA-skadereaktion; testning av känslighet och resistens mot kemoterapi (cisplatin, paklitaxel, gemcitabin); utvärdering av målinriktade läkemedel; profilering av läkemedelskänslighet inom DepMap- och CCLE-ramverken; upptäckt av biomarkörer för NSCLC med blandad histologi; jämförande genomik; samt proteomisk/transkriptomisk profilering. HCC366 har även bidragit till studier av lungcancercellers biologi, inklusive mekanismer för proliferation, migration och invasion som är relevanta för malign pleuralsjukdom.
- Vävnad
- Lungan
- Sjukdom
- Icke småcellig lungcancer
- Metastaseringsställe
- Malign pleuralvätska (provtagningsställe)
- Ansökningar
- Forskning om icke-småcellig lungcancer (NSCLC); biologin bakom adenoskvamöst lungkarcinom; studier av funktionsförstärkning av TP53 p.Tyr220Cys; ATM:s DNA-skadereaktion; känslighet för kemoterapi (cisplatin, paklitaxel, gemcitabin); DepMap/CCLE-profilering av läkemedelskänslighet; upptäckt av biomarkörer; jämförande genomik av NSCLC; biologin bakom maligna pleuralsjukdomar
- Synonymer
- HCC-366
- HCC0366
- Hamon Cancer Center 366
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Kvinna
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- GMO-status
- Utan genetiskt modifierade organismer
- Detaljer om GMO-status
- No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande
- Celltyp
- Epiteliala celler
- MSI-status
- MSS
- Fördubblingstid
- ca 60–70 timmar
04Identifierare
- Källa
- HCC366 (Cytion katalognummer 302155)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2059
05Uttryck och mottaglighet
- Mutationsprofil
- TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) homozygot; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) heterozygot
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% värmeinaktiverad FBS
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Uppdelningsförhållande
- 1 till 5
- Såtäthet
- 1 till 3 × 10⁴ celler/cm²
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Återhämtning efter upptining
- Efter upptining ska cellerna odlas ut med en täthet på 5 × 10⁴ celler/cm² och få vidhäfta i minst 24 timmar innan det första medielbytet.
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- 80 år
- Etnicitet
- Europeiska
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja