الانتقال إلى المحتوى
HCC366
الأنسجة
الرئة
المرض
سرطان الرئة ذو الخلايا غير الصغيرة
موقع الانتشار
الانصباب الجنبي الخبيث (موقع أخذ العينة)
المرادفات
HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366

المستندات

HCC366

Cell line · رقم المنتج 302155

HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

HCC366 هو خط خلوي لسرطان الرئة الغدي-القرني البشري، تم إنشاؤه من الانصباب الجنبي الخبيث لمريضة أوروبية تبلغ من العمر 80 عامًا في مركز هامون للسرطان، التابع للمركز الطبي الجنوبي الغربي بجامعة تكساس. والسرطان الغدي الحرشفي هو نوع فرعي نسيجي مختلط نادر من سرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة (NSCLC)، يجمع بين سمات كل من السرطان الغدي وسرطان الخلايا الحرشفية. يُدرج HCC366 في خريطة تبعيات السرطان (DepMap)، وCCLE، وخطوط الخلايا COSMIC، ولوحات مشروع خطوط الخلايا في مركز إم دي أندرسون. يحمل هذا الخط طفرة متماثلة في جين TP53 p.Tyr220Cys (وهي طفرة هيكلية في مجال الارتباط بالحمض النووي) وطفرة غير متماثلة في جين ATM p.Pro534Ala. ولا يحمل هذا الخط طفرات محفزة في جينات KRAS أو EGFR أو STK11، ويُظهر استقرارًا في الميكروساتلايت (MSS). ويبلغ زمن التضاعف حوالي 60–70 ساعة.

يُستخدم HCC366 في أبحاث سرطان الرئة غير صغير الخلايا (NSCLC)، لا سيما في دراسات بيولوجيا سرطان الرئة الغدي-القرني، الذي لا يزال غير مدروس بشكل كافٍ مقارنةً بأنواع فرعية سرطان الغدية الخالص أو سرطان الخلايا الحرشفية. وتشمل التطبيقات الرئيسية ما يلي: دراسات طفرات اكتساب وظيفة جين TP53؛ استجابة تلف الحمض النووي بوساطة ATM؛ اختبارات الحساسية والمقاومة للعلاج الكيميائي (السيسبلاتين، باكليتاكسيل، جيمسيتابين)؛ تقييم العوامل المستهدفة؛ تحديد ملامح حساسية الأدوية ضمن أطر عمل DepMap وCCLE؛ اكتشاف المؤشرات الحيوية لسرطان الرئة غير صغير الخلايا ذي النسيج المختلط؛ الجينوميات المقارنة؛ وتحديد ملامح البروتينات/النسخ الجيني. كما ساهم HCC366 في دراسات بيولوجيا خلايا سرطان الرئة، بما في ذلك آليات التكاثر والهجرة والغزو ذات الصلة بأمراض الغشاء الجنبي الخبيثة.

الأنسجة
الرئة
المرض
سرطان الرئة ذو الخلايا غير الصغيرة
موقع الانتشار
الانصباب الجنبي الخبيث (موقع أخذ العينة)
التطبيقات
أبحاث سرطان الرئة غير صغير الخلايا (NSCLC)؛ بيولوجيا سرطان الرئة الغدي-الحرشفي؛ دراسات اكتساب وظيفة جين TP53 p.Tyr220Cys؛ استجابة جين ATM لتلف الحمض النووي؛ حساسية العلاج الكيميائي (السيسبلاتين، الباكليتاكسيل، الجيمسيتابين)؛ تحليل ملامح حساسية الأدوية باستخدام DepMap/CCLE؛ اكتشاف المؤشرات الحيوية؛ الجينوميات المقارنة لسرطان الرئة غير صغير الخلايا (NSCLC)؛ بيولوجيا أمراض الغشاء الجنبي الخبيثة
المرادفات
  • HCC-366
  • HCC0366
  • Hamon Cancer Center 366

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
خالية من الكائنات المعدلة وراثيًا
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الخلايا الظهارية
حالة MSI
MSS
زمن المضاعفة
حوالي 60 إلى 70 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HCC366 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 302155)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_2059

05التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) متماثل؛ ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) غير متماثل

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
إضافة 10% من FBS المعطل بالحرارة إلى الوسط
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
نسبة التقسيم
من 1 إلى 5
كثافة البذر
من 1 إلى 3 × 10⁴ خلية/سم²
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد إذابة الثلج، قم بزرع الخلايا بمعدل 5 × 10⁴ خلية/سم² واتركها لمدة 24 ساعة على الأقل حتى تلتصق قبل إجراء أول تغيير للوسط.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
80 عاماً
الأصل العرقي
أوروبي