Перейти до вмісту
HCC366
Тканина
Легені
Хвороба
Недрібноклітинний рак легенів
Місце метастазування
Злоякісний плевральний випіт (місце забору зразка)
Синоніми
HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366

Документи

HCC366

Cell line · Номер товару 302155

HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

HCC366 — це клітинна лінія аденосквамозної карциноми легенів людини, отримана з злоякісного плеврального випоту 80-річної пацієнтки європейського походження в Онкологічному центрі Хамона при Медичному центрі UT Southwestern. Аденосквамозна карцинома — це рідкісний змішаний гістологічний підтип недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ), що поєднує ознаки як аденокарциноми, так і плоскоклітинної карциноми. HCC366 входить до панелей «Карти залежності раку» (DepMap), CCLE, клітинних ліній COSMIC та проєкту клітинних ліній MD Anderson. Ця лінія несе гомозиготну мутацію TP53 p.Tyr220Cys (структурну мутацію домену зв’язування з ДНК) та гетерозиготну мутацію ATM p.Pro534Ala. Вона не несе драйверних мутацій KRAS, EGFR або STK11 та демонструє мікросателітну стабільність (MSS). Час подвоєння становить приблизно 60–70 годин.

HCC366 застосовується в дослідженнях НДРЛ, зокрема в дослідженнях біології аденосквамозної карциноми легенів, яка залишається недостатньо вивченою порівняно з підтипами чистої аденокарциноми або плоскоклітинної карциноми. Основні сфери застосування включають: дослідження мутацій TP53 із посиленням функції; реакцію на пошкодження ДНК, опосередковану ATM; тестування чутливості та резистентності до хіміотерапії (цисплатин, паклітаксел, гемцитабін); оцінку цільових препаратів; профілювання чутливості до ліків у рамках DepMap та CCLE; виявлення біомаркерів для НДРЛ зі змішаною гістологією; порівняльну геноміку; а також протеомне/транскриптомне профілювання. Лінія HCC366 також зробила внесок у дослідження клітинної біології раку легенів, зокрема механізмів проліферації, міграції та інвазії, що мають значення для злоякісних захворювань плеври.

Тканина
Легені
Хвороба
Недрібноклітинний рак легенів
Місце метастазування
Злоякісний плевральний випіт (місце забору зразка)
Застосування
Дослідження недрібноклітинного раку легенів (NSCLC); біологія аденосквамозної карциноми легенів; дослідження набуття функції гена TP53 p.Tyr220Cys; реакція ATM на пошкодження ДНК; чутливість до хіміотерапії (цисплатин, паклітаксел, гемцитабін); профілювання чутливості до ліків за допомогою DepMap/CCLE; виявлення біомаркерів; порівняльна геноміка НДРЛ; біологія злоякісних захворювань плеври
Синоніми
  • HCC-366
  • HCC0366
  • Hamon Cancer Center 366

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
Без ГМО
Детальна інформація щодо статусу ГМО
No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Епітеліальні клітини
Статус MSI
MSS
Час подвоєння
приблизно від 60 до 70 годин

04Ідентифікатори

Посилання
HCC366 (номер за каталогом Cytion 302155)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_2059

05Експресія та сприйнятливість

Профіль мутацій
TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) — гомозиготний; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) — гетерозиготний

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% термоінактивованого FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Коефіцієнт розподілу
від 1 до 5
Щільність висіву
від 1 до 3 × 10⁴ клітин/см²
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 × 10⁴ клітин/см² і дайте їм прикріпитися протягом щонайменше 24 годин перед першою заміною середовища.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
80 років
Етнічна приналежність
Європейський