Preskoči na vsebino
HCC366
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Nedrobnocelični pljučni rak
Mesto metastaze
Maligni plevralni izliv (mesto odvzema vzorca)
Sinonimi
HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366

Dokumenti

HCC366

Cell line · Številka izdelka 302155

HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

HCC366 je celična linija adenoskvamoznega karcinoma človeških pljuč, vzpostavljena iz malignega pleuralnega izliva pri 80-letni evropski pacientki v Hamon Cancer Centerju, UT Southwestern Medical Center. Adenoskvamozni karcinom je redek mešani histološki podtip nedrobnoceličnega pljučnega raka (NSCLC), ki združuje značilnosti adenokarcinoma in skvamoznega karcinoma. HCC366 je vključen v panele Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC in MD Anderson Cell Lines Project. Linija nosi homozigotno mutacijo TP53 p.Tyr220Cys (strukturna mutacija domene za vezavo na DNK) in heterozigotno mutacijo ATM p.Pro534Ala. Ne nosi gonilnih mutacij KRAS, EGFR ali STK11 ter kaže mikrosatelitsko stabilnost (MSS). Čas podvojitve je približno 60–70 ur.

HCC366 se uporablja v raziskavah NSCLC, zlasti v študijah biologije pljučnega adenoskvamoznega karcinoma, ki je v primerjavi s podtipi čistega adenokarcinoma ali skvamoznega karcinoma še vedno premalo raziskan. Ključne uporabe vključujejo: študije mutacij s pridobitvijo funkcije gena TP53; odziv na poškodbe DNK, posredovan z ATM; testiranje občutljivosti in odpornosti na kemoterapijo (cisplatin, paklitaksel, gemcitabin); ocenjevanje ciljnih zdravil; profiliranje občutljivosti na zdravila v okvirih DepMap in CCLE; odkrivanje biomarkerjev za NSCLC z mešano histologijo; primerjalno genomiko; ter proteomsko/transkriptomsko profiliranje. HCC366 je prispeval tudi k študijam celične biologije pljučnega raka, vključno z mehanizmi proliferacije, migracije in invazije, ki so pomembni za maligno pleuralno bolezen.

Tkivo
Pljuča
Bolezen
Nedrobnocelični pljučni rak
Mesto metastaze
Maligni plevralni izliv (mesto odvzema vzorca)
Uporaba
Raziskave NSCLC; biologija adenoskvamoznega karcinoma pljuč; študije pridobitve funkcije gena TP53 p.Tyr220Cys; odziv gena ATM na poškodbe DNK; občutljivost na kemoterapijo (cisplatin, paklitaksel, gemcitabin); profiliranje občutljivosti na zdravila z DepMap/CCLE; odkrivanje biomarkerjev; primerjalna genomika NSCLC; biologija malignih bolezni poprsnice
Sinonimi
  • HCC-366
  • HCC0366
  • Hamon Cancer Center 366

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
Brez gensko spremenjenih organizmov
Podrobnosti o statusu GSO
No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epitelijske celice
Stanje MSI
MSS
Čas podvojitve
približno 60 do 70 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HCC366 (kataloška številka Cytion 302155)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2059

05Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) homozigotno; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) heterozigotno

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % toplotno aktiviranega FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
1 do 3 × 10⁴ celic/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrznitvi celice razporedite po ploščah v gostoti 5 × 10⁴ celic/cm² in jim pred prvo zamenjavo gojišča pustite vsaj 24 ur časa za prirast.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
80 let
Etnična pripadnost
Evropski