HCC366

HCC366 to ludzka linia komórkowa raka adenoskwamowatego płuca, wyizolowana z złośliwego wysięku opłucnowego 80-letniej pacjentki pochodzenia europejskiego w Hamon Cancer Center przy UT Southwestern Medical Center. Rak adeno-płaskonabłonkowy jest rzadkim podtypem histologicznym niedrobnokomórkowego raka płuca (NSCLC), łączącym cechy zarówno gruczolakoraka, jak i raka płaskonabłonkowego. Linia HCC366 znajduje się w panelach Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC oraz w ramach projektu MD Anderson Cell Lines Project. Linia ta nosi homozygotyczną mutację TP53 p.Tyr220Cys (mutację strukturalną domeny wiążącej DNA) oraz heterozygotyczną mutację ATM p.Pro534Ala. Nie wykazuje mutacji sterujących w genach KRAS, EGFR ani STK11 oraz charakteryzuje się stabilnością mikrosatelitarową (MSS). Czas podwojenia wynosi około 60–70 godzin.

Linia HCC366 ma zastosowanie w badaniach nad niedrobnokomórkowym rakiem płuca (NSCLC), w szczególności w badaniach nad biologią raka płuca typu adeno-płaskonabłonkowego, który pozostaje niedostatecznie zbadany w porównaniu z podtypami czystego gruczolakoraka lub raka płaskonabłonkowego. Kluczowe zastosowania obejmują: badania mutacji powodujących wzmocnienie funkcji genu TP53; reakcję na uszkodzenia DNA, w której pośredniczy ATM; badania wrażliwości i oporności na chemioterapię (cisplatyna, paklitaksel, gemcytabina); ocenę leków celowanych; profilowanie wrażliwości na leki w ramach platform DepMap i CCLE; odkrywanie biomarkerów dla NSCLC o mieszanej histologii; genomikę porównawczą; oraz profilowanie proteomiczne i transkryptomiczne. Linia HCC366 przyczyniła się również do badań nad biologią komórek raka płuca, w tym nad mechanizmami proliferacji, migracji i inwazji istotnymi w przypadku złośliwych chorób opłucnej.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym