
- Tkáň
- Plíce
- Nemoc
- Nemalobuněčný karcinom plic
- Místo metastázy
- Maligní pleurální výpotek (místo odběru vzorku)
- Synonyma
- HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366
Dokumenty
HCC366
Cell line · Číslo výrobku 302155
HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...
Přizpůsobení / Doporučení
- HCC366Cell line€430.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
HCC366 je buněčná linie adenoskvamózního karcinomu lidských plic, která byla izolována z maligního pleurálního výpotku 80leté evropské pacientky v Hamon Cancer Center při UT Southwestern Medical Center. Adenoskvamózní karcinom je vzácný smíšený histologický podtyp nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC), který kombinuje rysy adenokarcinomu i skvamózního karcinomu. HCC366 je zahrnuta v panelech Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC a v rámci projektu MD Anderson Cell Lines Project. Tato buněčná linie nese homozygotní mutaci TP53 p.Tyr220Cys (strukturální mutaci domény vázající DNA) a heterozygotní mutaci ATM p.Pro534Ala. Nenese driverové mutace v genech KRAS, EGFR ani STK11 a vykazuje mikrosatelitní stabilitu (MSS). Doba zdvojnásobení je přibližně 60–70 hodin.
HCC366 je vhodná pro výzkum NSCLC, zejména pro studie biologie adenoskvamózního karcinomu plic, který zůstává ve srovnání s podtypy čistého adenokarcinomu nebo skvamózního karcinomu dosud nedostatečně prozkoumán. Mezi klíčové aplikace patří: studie mutací s funkčním ziskem genu TP53; reakce na poškození DNA zprostředkovaná ATM; testování citlivosti a rezistence na chemoterapii (cisplatina, paklitaxel, gemcitabin); hodnocení cílených léčiv; profilování citlivosti na léky v rámci rámců DepMap a CCLE; objev biomarkerů pro NSCLC se smíšenou histologií; srovnávací genomika; a proteomické/transkriptomické profilování. Kmen HCC366 rovněž přispěl ke studiím buněčné biologie rakoviny plic, včetně mechanismů proliferace, migrace a invaze relevantních pro maligní onemocnění pohrudnice.
- Tkáň
- Plíce
- Nemoc
- Nemalobuněčný karcinom plic
- Místo metastázy
- Maligní pleurální výpotek (místo odběru vzorku)
- Aplikace
- Výzkum NSCLC; biologie adenoskvamózního karcinomu plic; studie získání funkce genu TP53 p.Tyr220Cys; reakce ATM na poškození DNA; citlivost na chemoterapii (cisplatina, paklitaxel, gemcitabin); profilování citlivosti na léky pomocí DepMap/CCLE; objevování biomarkerů; komparativní genomika NSCLC; biologie maligních pleurálních onemocnění
- Synonyma
- HCC-366
- HCC0366
- Hamon Cancer Center 366
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Žena
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- Bez GMO
- Podrobnosti o statusu GMO
- No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelu podobné
- Typ buňky
- Epitelové buňky
- Stav MSI
- MSS
- Doba zdvojnásobení
- přibližně 60 až 70 hodin
04Identifikátory
- Citace
- HCC366 (katalogové číslo Cytion 302155)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2059
05Exprese a náchylnost
- Mutační profil
- TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) – homozygotní; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) – heterozygotní
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10 % tepelně inaktivovaného FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Poměr rozdělení
- 1 až 5
- Hustota výsevu
- 1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Zotavení po rozmrazení
- Po rozmrazení naneste buňky na kultivační misky v hustotě 5 × 10⁴ buněk/cm² a před první výměnou média počkejte alespoň 24 hodin, aby se buňky přichytily.
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Věk dárce
- 80 let
- Etnická příslušnost
- Evropská
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano