HCC366

A HCC366 é uma linha celular de carcinoma adenoescamoso pulmonar humano, estabelecida a partir do derrame pleural maligno de uma doente europeia de 80 anos no Hamon Cancer Center, do UT Southwestern Medical Center. O carcinoma adenoescamoso é um subtipo histológico misto raro de cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC), que combina características tanto do adenocarcinoma como do carcinoma de células escamosas. A HCC366 está incluída nos painéis do Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, linhas celulares COSMIC e no MD Anderson Cell Lines Project. A linha apresenta uma mutação homozigótica TP53 p.Tyr220Cys (uma mutação estrutural do domínio de ligação ao ADN) e uma mutação heterozigótica ATM p.Pro534Ala. Não apresenta mutações impulsionadoras nos genes KRAS, EGFR ou STK11 e apresenta estabilidade de microssatélites (MSS). O tempo de duplicação é de aproximadamente 60–70 horas.

A HCC366 é aplicável na investigação do NSCLC, particularmente em estudos sobre a biologia do carcinoma adenoescamoso do pulmão, que continua a ser pouco estudada em comparação com os subtipos de adenocarcinoma puro ou de carcinoma de células escamosas. As principais aplicações incluem: estudos de mutações de ganho de função do TP53; resposta a danos no ADN mediada pela ATM; testes de sensibilidade e resistência à quimioterapia (cisplatina, paclitaxel, gemcitabina); avaliação de agentes direcionados; perfil de sensibilidade a fármacos nas estruturas DepMap e CCLE; descoberta de biomarcadores para o NSCLC de histologia mista; genómica comparativa; e perfil proteómico/transcriptómico. A linha celular HCC366 também contribuiu para estudos sobre a biologia celular do cancro do pulmão, incluindo mecanismos de proliferação, migração e invasão relevantes para a doença pleural maligna.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia