Gå til innholdet
HCC366
Vev
Lunge
Sykdom
Ikke-småcellet lungekreft
Metastaseområde
Malign pleural effusjon (sted for prøvetaking)
Synonymer
HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366

Dokumenter

HCC366

Cell line · Produktnummer 302155

HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HCC366 er en cellekultur av humant adenoskvamøst lungekarsinom, etablert fra ondartet pleuraleffusjon hos en 80 år gammel europeisk kvinnelig pasient ved Hamon Cancer Center, UT Southwestern Medical Center. Adenoskvamøst karsinom er en sjelden, blandet histologisk undertype av ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) som kombinerer trekk fra både adenokarsinom og plateepitelkarsinom. HCC366 er inkludert i panelene Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC-cellelinjer og MD Anderson Cell Lines Project. Linjen bærer en homozygot TP53 p.Tyr220Cys-mutasjon (en strukturell mutasjon i DNA-bindingsdomenet) og en heterozygot ATM p.Pro534Ala-mutasjon. Den bærer ikke KRAS-, EGFR- eller STK11-drivermutasjoner og viser mikrosatellittstabilitet (MSS). Doblingstiden er omtrent 60–70 timer.

HCC366 kan brukes i forskning på ikke-småcellet lungekreft (NSCLC), særlig i studier av biologien til adenoskvamøst lungekreft, som fortsatt er relativt lite undersøkt sammenlignet med subtyper av rent adenokarsinom eller plateepitelkarsinom. Viktige anvendelser inkluderer: studier av TP53-funksjonsgevinstmutasjoner; ATM-mediert DNA-skadereaksjon; testing av følsomhet og resistens overfor kjemoterapi (cisplatin, paklitaksel, gemcitabin); evaluering av målrettede legemidler; profilering av legemiddelfølsomhet innenfor DepMap- og CCLE-rammeverkene; oppdagelse av biomarkører for NSCLC med blandet histologi; komparativ genomikk; samt proteomisk/transkriptomisk profilering. HCC366 har også bidratt til studier av lungekreftcellers biologi, herunder proliferasjons-, migrasjons- og invasjonsmekanismer som er relevante for ondartet pleural sykdom.

Vev
Lunge
Sykdom
Ikke-småcellet lungekreft
Metastaseområde
Malign pleural effusjon (sted for prøvetaking)
Søknader
Forskning på ikke-småcellet lungekreft (NSCLC); biologi ved adenoskvamøst lungekreft; studier av funksjonsgevinst ved TP53 p.Tyr220Cys; ATM-respons på DNA-skade; følsomhet for kjemoterapi (cisplatin, paklitaksel, gemcitabin); DepMap/CCLE-profilering av medikamentfølsomhet; oppdagelse av biomarkører; komparativ genomikk ved NSCLC; biologi ved ondartet pleural sykdom
Synonymer
  • HCC-366
  • HCC0366
  • Hamon Cancer Center 366

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
Uten GMO
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelceller
MSI-status
MSS
Fordoblingstid
ca. 60 til 70 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HCC366 (Cytion-katalognummer 302155)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2059

05Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) homozygot; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) heterozygot

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % varmeinaktivert FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Oppdelingsforhold
1 til 5
Såtetthet
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter opptining skal cellene sås med en tetthet på 5 × 10⁴ celler/cm², og man må vente i minst 24 timer på at de skal feste seg før det første medieskiftet.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
80 år
Etnisitet
Europeisk