Ga naar de inhoud
HCC366
Weefsel
Long
Ziekte
Niet-kleincellige longkanker
Plaats van uitzaaiingen
Kwaadaardige pleurale effusie (plaats van monsterafname)
Synoniemen
HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366

Documenten

HCC366

Cell line · Productnummer 302155

HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

HCC366 is een menselijke adenosquameuze longcarcinoomcellijn die is geïsoleerd uit de maligne pleurale effusie van een 80-jarige Europese vrouwelijke patiënte in het Hamon Cancer Center, UT Southwestern Medical Center. Adenosquameus carcinoom is een zeldzaam gemengd histologisch subtype van niet-kleincellige longkanker (NSCLC) dat kenmerken van zowel adenocarcinoom als plaveiselcelcarcinoom combineert. HCC366 is opgenomen in de panelen van de Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC-cellijnen en het MD Anderson Cell Lines Project. De lijn draagt een homozygote TP53 p.Tyr220Cys-mutatie (een structurele mutatie van het DNA-bindingsdomein) en een heterozygote ATM p.Pro534Ala-mutatie. De lijn draagt geen KRAS-, EGFR- of STK11-drivermutaties en vertoont microsatellietstabiliteit (MSS). De verdubbelingstijd bedraagt ongeveer 60–70 uur.

HCC366 is geschikt voor onderzoek naar niet-kleincellig longcarcinoom (NSCLC), met name voor studies naar de biologie van adenosquameus longcarcinoom, een subtype dat nog onderbelicht is in vergelijking met zuivere adenocarcinoom- of plaveiselcelcarcinoom-subtypes. Belangrijke toepassingen zijn onder meer: onderzoek naar TP53-gain-of-function-mutaties; de door ATM gemedieerde reactie op DNA-schade; het testen van gevoeligheid en resistentie voor chemotherapie (cisplatine, paclitaxel, gemcitabine); de evaluatie van gerichte geneesmiddelen; het opstellen van geneesmiddelgevoeligheidsprofielen binnen de DepMap- en CCLE-kaders; het ontdekken van biomarkers voor NSCLC met gemengde histologie; vergelijkende genomica; en proteomische/transcriptomische profilering. HCC366 heeft ook bijgedragen aan onderzoek naar de celbiologie van longkanker, waaronder proliferatie-, migratie- en invasiemechanismen die relevant zijn voor maligne pleurale aandoeningen.

Weefsel
Long
Ziekte
Niet-kleincellige longkanker
Plaats van uitzaaiingen
Kwaadaardige pleurale effusie (plaats van monsterafname)
Toepassingen
Onderzoek naar NSCLC; biologie van adenosquameus longcarcinoom; studies naar de gain-of-function van TP53 p.Tyr220Cys; ATM-reactie op DNA-schade; gevoeligheid voor chemotherapie (cisplatine, paclitaxel, gemcitabine); DepMap/CCLE-profilering van geneesmiddelgevoeligheid; ontdekking van biomarkers; vergelijkende genomica bij NSCLC; biologie van maligne pleurale aandoeningen
Synoniemen
  • HCC-366
  • HCC0366
  • Hamon Cancer Center 366

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
Zonder genetisch gemodificeerde organismen
Details over de GGO-status
No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheelcellen
MSI-status
MSS
Verdubbelingstijd
ongeveer 60 tot 70 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HCC366 (Cytion catalogusnummer 302155)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2059

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) homozygoot; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) heterozygoot

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% hitte-geïnactiveerde FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 5
Zaaidichtheid
1 tot 3 × 10⁴ cellen/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Breng de cellen na het ontdooien uit op een celkweekplaat met een dichtheid van 5 × 10⁴ cellen/cm² en laat ze ten minste 24 uur hechten voordat u het medium voor het eerst vervangt.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
80 jaar
Etnische afkomst
Europese