Mine otse sisu juurde
HCC366
Kude
Kopsud
Haigus
Mitteväikerakk-kopsuvähk
Metastaaside asukoht
Pahaloomuline pleuraefusioon (proovi võtmise koht)
Sünonüümid
HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366

Dokumendid

HCC366

Cell line · Toote number 302155

HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HCC366 on inimese kopsu adenoskvamoosne kartsinoomi rakuliin, mis on saadud 80-aastase Euroopa päritolu naispatsiendi pahaloomulisest pleuraefusioonist Hamoni vähikeskuses (Hamon Cancer Center), mis kuulub UT Southwestern Medical Centerisse. Adenoskvamoosne kartsinoom on haruldane mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) segahistoloogiline alatüüp, milles ühinevad nii adenokartsinoomi kui ka skvamooksrakulise kartsinoomi tunnused. HCC366 kuulub Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC rakuliinide ja MD Anderson Cell Lines Projecti paneelidesse. Sellel liinil esineb homosügootne TP53 p.Tyr220Cys-mutatsioon (DNA-sidumisdomeeni struktuuriline mutatsioon) ja heterosügootne ATM p.Pro534Ala-mutatsioon. Sellel puuduvad KRAS-, EGFR- või STK11-juhtmutatsioonid ning see on mikrosatelliitide poolest stabiilne (MSS). Rakude kahekordistumisaeg on umbes 60–70 tundi.

HCC366 sobib kasutamiseks mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) uurimisel, eriti kopsu adenoskvamoosse kartsinoomi bioloogia uuringutes, mida on võrreldes puhta adenokartsinoomi või skvamoolse kartsinoomi alatüüpidega seni vähe uuritud. Peamised rakendused hõlmavad: TP53 funktsiooni võimendava mutatsiooni uuringud; ATM-vahendatud DNA-kahjustusele reageerimine; kemoteraapia tundlikkuse ja resistentsuse testimine (tsisplatiin, paklitakseel, gemtsitabiin); sihtravimite hindamine; ravimitundlikkuse profiilide koostamine DepMap- ja CCLE-raamistike raames; biomarkerite avastamine segahistoloogilise NSCLC puhul; võrdlev genoomika; ning proteoomilised/transkriptoomilised profiilid. HCC366 on aidanud kaasa ka kopsuvähi rakubioloogia uuringutele, sealhulgas pahaloomulise pleurahaigusega seotud proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiivsuse mehhanismide uurimisele.

Kude
Kopsud
Haigus
Mitteväikerakk-kopsuvähk
Metastaaside asukoht
Pahaloomuline pleuraefusioon (proovi võtmise koht)
Rakendused
NSCLC-uuringud; kopsu adenoskvamoosse kartsinoomi bioloogia; TP53 p.Tyr220Cys funktsiooni tugevnemise uuringud; ATM-i DNA-kahjustusele reageerimine; kemoteraapia tundlikkus (tsisplatiin, paklitakseel, gemtsitabiin); DepMap/CCLE ravimite tundlikkuse profiilide koostamine; biomarkerite avastamine; NSCLC võrdlev genoomika; pahaloomulise pleurahaiguse bioloogia
Sünonüümid
  • HCC-366
  • HCC0366
  • Hamon Cancer Center 366

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakud
MSI staatus
MSS
Kahekordistumisaeg
umbes 60–70 tundi

04Tunnused

Viide
HCC366 (Cytioni katalooginumber 302155)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2059

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) homosügootne; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) heterosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
1–3 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist külvake rakud tihedusega 5 × 10⁴ rakku/cm² ja laske neil enne esimest kasvukeskkonna vahetust vähemalt 24 tundi kinnituda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
80 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa