
- Kude
- Kopsud
- Haigus
- Mitteväikerakk-kopsuvähk
- Metastaaside asukoht
- Pahaloomuline pleuraefusioon (proovi võtmise koht)
- Sünonüümid
- HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366
Dokumendid
HCC366
Cell line · Toote number 302155
HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...
Kohandamine / Soovitused
- HCC366Cell line€430.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
HCC366 on inimese kopsu adenoskvamoosne kartsinoomi rakuliin, mis on saadud 80-aastase Euroopa päritolu naispatsiendi pahaloomulisest pleuraefusioonist Hamoni vähikeskuses (Hamon Cancer Center), mis kuulub UT Southwestern Medical Centerisse. Adenoskvamoosne kartsinoom on haruldane mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) segahistoloogiline alatüüp, milles ühinevad nii adenokartsinoomi kui ka skvamooksrakulise kartsinoomi tunnused. HCC366 kuulub Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC rakuliinide ja MD Anderson Cell Lines Projecti paneelidesse. Sellel liinil esineb homosügootne TP53 p.Tyr220Cys-mutatsioon (DNA-sidumisdomeeni struktuuriline mutatsioon) ja heterosügootne ATM p.Pro534Ala-mutatsioon. Sellel puuduvad KRAS-, EGFR- või STK11-juhtmutatsioonid ning see on mikrosatelliitide poolest stabiilne (MSS). Rakude kahekordistumisaeg on umbes 60–70 tundi.
HCC366 sobib kasutamiseks mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) uurimisel, eriti kopsu adenoskvamoosse kartsinoomi bioloogia uuringutes, mida on võrreldes puhta adenokartsinoomi või skvamoolse kartsinoomi alatüüpidega seni vähe uuritud. Peamised rakendused hõlmavad: TP53 funktsiooni võimendava mutatsiooni uuringud; ATM-vahendatud DNA-kahjustusele reageerimine; kemoteraapia tundlikkuse ja resistentsuse testimine (tsisplatiin, paklitakseel, gemtsitabiin); sihtravimite hindamine; ravimitundlikkuse profiilide koostamine DepMap- ja CCLE-raamistike raames; biomarkerite avastamine segahistoloogilise NSCLC puhul; võrdlev genoomika; ning proteoomilised/transkriptoomilised profiilid. HCC366 on aidanud kaasa ka kopsuvähi rakubioloogia uuringutele, sealhulgas pahaloomulise pleurahaigusega seotud proliferatsiooni, migratsiooni ja invasiivsuse mehhanismide uurimisele.
- Kude
- Kopsud
- Haigus
- Mitteväikerakk-kopsuvähk
- Metastaaside asukoht
- Pahaloomuline pleuraefusioon (proovi võtmise koht)
- Rakendused
- NSCLC-uuringud; kopsu adenoskvamoosse kartsinoomi bioloogia; TP53 p.Tyr220Cys funktsiooni tugevnemise uuringud; ATM-i DNA-kahjustusele reageerimine; kemoteraapia tundlikkus (tsisplatiin, paklitakseel, gemtsitabiin); DepMap/CCLE ravimite tundlikkuse profiilide koostamine; biomarkerite avastamine; NSCLC võrdlev genoomika; pahaloomulise pleurahaiguse bioloogia
- Sünonüümid
- HCC-366
- HCC0366
- Hamon Cancer Center 366
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- GMO-staatus
- GMO-vaba
- GMO-staatuse üksikasjad
- No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Rakutüüp
- Epiteelirakud
- MSI staatus
- MSS
- Kahekordistumisaeg
- umbes 60–70 tundi
04Tunnused
- Viide
- HCC366 (Cytioni katalooginumber 302155)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2059
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Mutatsiooniprofiil
- TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) homosügootne; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) heterosügootne
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Jagamissuhe
- 1–5
- Külvitihedus
- 1–3 × 10⁴ rakku/cm²
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Taastumine pärast sulamist
- Pärast sulatamist külvake rakud tihedusega 5 × 10⁴ rakku/cm² ja laske neil enne esimest kasvukeskkonna vahetust vähemalt 24 tundi kinnituda.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- 80 aastat
- Etniline kuuluvus
- Euroopa
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah