HCC366

La HCC366 es una línea celular de carcinoma adenoescamoso pulmonar humano obtenida a partir del derrame pleural maligno de una paciente europea de 80 años en el Hamon Cancer Center, del UT Southwestern Medical Center. El carcinoma adenoescamoso es un subtipo histológico mixto poco frecuente de cáncer de pulmón no microcítico (CPNM) que combina características tanto del adenocarcinoma como del carcinoma de células escamosas. La línea HCC366 está incluida en los paneles del Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, líneas celulares COSMIC y el Proyecto de Líneas Celulares del MD Anderson. La línea presenta una mutación homocigótica en TP53 p.Tyr220Cys (una mutación estructural del dominio de unión al ADN) y una mutación heterocigótica en ATM p.Pro534Ala. No presenta mutaciones impulsoras en los genes KRAS, EGFR ni STK11, y muestra estabilidad de microsatélites (MSS). El tiempo de duplicación es de aproximadamente 60-70 horas.

La línea HCC366 es aplicable en la investigación del cáncer de pulmón no microcítico (NSCLC), especialmente en estudios sobre la biología del carcinoma adenoescamoso de pulmón, que sigue estando poco estudiada en comparación con los subtipos de adenocarcinoma puro o carcinoma de células escamosas. Entre sus aplicaciones clave se incluyen: estudios de mutaciones de ganancia de función en TP53; la respuesta al daño en el ADN mediada por ATM; pruebas de sensibilidad y resistencia a la quimioterapia (cisplatino, paclitaxel, gemcitabina); evaluación de agentes dirigidos; perfiles de sensibilidad a fármacos en los marcos DepMap y CCLE; descubrimiento de biomarcadores para el CPCNP de histología mixta; genómica comparativa; y perfiles proteómicos y transcriptómicos. La línea celular HCC366 también ha contribuido a estudios sobre la biología celular del cáncer de pulmón, incluidos los mecanismos de proliferación, migración e invasión relevantes para la enfermedad pleural maligna.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía