Gå direkte til indholdet
HCC366
Væv
Lunge
Sygdom
Ikke-småcellet lungekræft
Metastasested
Malign pleural effusion (sted for prøveudtagning)
Synonymer
HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366

Dokumenter

HCC366

Cell line · Varenummer 302155

HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HCC366 er en cellekultur af humant adenoskvamøst lungekarcinom, der er isoleret fra den maligne pleuralvæske hos en 80-årig europæisk kvindelig patient ved Hamon Cancer Center, UT Southwestern Medical Center. Adenoskvamøst karcinom er en sjælden blandet histologisk undertype af ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), der kombinerer træk fra både adenokarcinom og pladecellekarcinom. HCC366 indgår i panelerne Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC-cellelinjer og MD Anderson Cell Lines Project. Linjen bærer en homozygot TP53 p.Tyr220Cys-mutation (en strukturel mutation i DNA-bindingsdomænet) og en heterozygot ATM p.Pro534Ala-mutation. Den bærer ikke KRAS-, EGFR- eller STK11-drivermutationer og udviser mikrosatellitstabilitet (MSS). Fordoblingstiden er ca. 60–70 timer.

HCC366 kan anvendes i forskning i ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), især i studier af biologien bag adenoskvamøst lungekræft, som fortsat er underudforsket i forhold til subtyperne af rent adenokarcinom eller pladecellekarcinom. De vigtigste anvendelsesområder omfatter: undersøgelser af TP53-gain-of-function-mutationer; ATM-medieret DNA-skadesrespons; testning af følsomhed og resistens over for kemoterapi (cisplatin, paclitaxel, gemcitabin); evaluering af målrettede lægemidler; profilering af lægemiddelfølsomhed inden for DepMap- og CCLE-rammerne; opdagelse af biomarkører for NSCLC med blandet histologi; komparativ genomik; samt proteomisk/transkriptomisk profilering. HCC366 har også bidraget til undersøgelser af lungekræftcellers biologi, herunder proliferations-, migrations- og invasionsmekanismer, der er relevante for malign pleural sygdom.

Væv
Lunge
Sygdom
Ikke-småcellet lungekræft
Metastasested
Malign pleural effusion (sted for prøveudtagning)
Anvendelser
Forskning i NSCLC; biologien bag adenoskvamøst lungekarcinom; undersøgelser af TP53 p.Tyr220Cys-funktionsforstærkning; ATM-respons på DNA-skader; følsomhed over for kemoterapi (cisplatin, paclitaxel, gemcitabin); DepMap/CCLE-profilering af lægemiddelfølsomhed; opdagelse af biomarkører; komparativ genomik ved NSCLC; biologi ved malign pleural sygdom
Synonymer
  • HCC-366
  • HCC0366
  • Hamon Cancer Center 366

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-fri
Oplysninger om GMO-status
No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitheliale celler
MSI-status
MSS
Fordoblingstid
ca. 60 til 70 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HCC366 (Cytion katalognummer 302155)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2059

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) homozygot; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) heterozygot

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % varmeinaktiveret FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
1 til 3 × 10⁴ celler/cm²
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning udplades cellerne med en tæthed på 5 × 10⁴ celler/cm², og der skal gå mindst 24 timer, før det første medieskift foretages, så cellerne kan hæfte sig fast.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
80 år
Etnisk tilhørsforhold
Europæisk