Langsung ke isi
HCC366
Tisu
Paru-paru
Penyakit
Kanker paru-paru sel non-kecil
Lokasi metastasis
Efusi pleura ganas (lokasi pengambilan sampel)
Sinonim
HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366

Dokumen

HCC366

Cell line · Nomor produk 302155

HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

HCC366 adalah garis sel karsinoma adenoskuamosa paru manusia yang diisolasi dari efusi pleura maligna seorang pasien perempuan Eropa berusia 80 tahun di Hamon Cancer Center, UT Southwestern Medical Center. Karsinoma adenoskuamosa adalah subtipe histologis campuran yang jarang ditemukan pada kanker paru-paru sel non-kecil (NSCLC), yang menggabungkan ciri-ciri karsinoma adenokarsinoma dan karsinoma sel skuamosa. HCC366 termasuk dalam panel Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, garis sel COSMIC, dan MD Anderson Cell Lines Project. Lini sel ini membawa mutasi homozigot TP53 p.Tyr220Cys (mutasi struktural pada domain pengikat DNA) dan mutasi heterozigot ATM p.Pro534Ala. Baris sel ini tidak membawa mutasi penggerak KRAS, EGFR, atau STK11, dan menunjukkan stabilitas mikrosatelit (MSS). Waktu penggandaan selnya sekitar 60–70 jam.

HCC366 dapat digunakan dalam penelitian NSCLC, khususnya dalam studi biologi karsinoma adenoskuamosa paru, yang masih kurang diteliti dibandingkan dengan subtipe adenokarsinoma murni atau karsinoma sel skuamosa. Aplikasi utamanya meliputi: studi mutasi gain-of-function TP53; respon kerusakan DNA yang dimediasi ATM; pengujian sensitivitas dan resistensi terhadap kemoterapi (cisplatin, paclitaxel, gemcitabine); evaluasi agen bertarget; profil sensitivitas obat dalam kerangka kerja DepMap dan CCLE; penemuan biomarker untuk NSCLC dengan histologi campuran; genomika komparatif; serta profil proteomik/transkriptomik. HCC366 juga telah berkontribusi pada studi biologi sel kanker paru-paru, termasuk mekanisme proliferasi, migrasi, dan invasi yang relevan dengan penyakit pleura ganas.

Tisu
Paru-paru
Penyakit
Kanker paru-paru sel non-kecil
Lokasi metastasis
Efusi pleura ganas (lokasi pengambilan sampel)
Aplikasi
Penelitian NSCLC; biologi karsinoma adenoskuamosa paru; studi gain-of-function TP53 p.Tyr220Cys; respons ATM terhadap kerusakan DNA; sensitivitas terhadap kemoterapi (cisplatin, paclitaxel, gemcitabine); profiling sensitivitas obat DepMap/CCLE; penemuan biomarker; genomika komparatif NSCLC; biologi penyakit pleura ganas
Sinonim
  • HCC-366
  • HCC0366
  • Hamon Cancer Center 366

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
Bebas Transgenik
Rincian status GMO
No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Jenis sel
Sel epitel
Status MSI
MSS
Waktu penggandaan
sekitar 60 hingga 70 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
HCC366 (Nomor katalog Cytion 302155)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2059

05Ekspresi dan kerentanan

Profil mutasi
TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) homozigot; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) heterozigot

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS yang dinonaktifkan dengan panas
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Rasio pemisahan
1 sampai 5
Kepadatan penanaman
1 hingga 3 × 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 × 10⁴ sel/cm² dan biarkan setidaknya selama 24 jam agar sel menempel sebelum penggantian medium pertama.
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
80 tahun
Etnis
Eropa