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Lenti-X293T
Tissu
Rein embryonnaire
Maladie
Lignée cellulaire transformée (cellules HEK transformées par l'ADN de l'adénovirus de type 5)
Synonymes
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Documents

Lenti-X293T

Cell line · Référence du produit 305820

Les cellules Lenti-X293T sont issues de la lignée rénale embryonnaire humaine 293T ; elles ont été modifiées et optimisées spécifiquement pour l'utilisation de vecteurs lentiviraux à haut rendement...

€550.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules Lenti-X293T sont un dérivé de la lignée rénale embryonnaire humaine 293T, conçues et optimisées spécifiquement pour la production de vecteurs lentiviraux à haut rendement. À l'instar des cellules parentales 293T, elles expriment de manière stable l'antigène T grand SV40, qui permet la réplication épisomale des plasmides contenant l'origine de réplication SV40 et améliore considérablement l'efficacité de la transfection transitoire. Les cellules Lenti-X293T présentent une morphologie épithéliale adhérente et des caractéristiques de croissance robustes dans des conditions de culture standard supplémentées en sérum, ce qui permet des cultures à haute densité adaptées aux flux de travail de production virale à grande échelle.

Cette lignée cellulaire a été sélectionnée pour ses performances de transfection supérieures à l'aide de réactifs à base de phosphate de calcium, de lipides ou de polymères, ce qui se traduit par des titres lentiviraux constamment élevés par rapport aux populations HEK293T conventionnelles. L'augmentation de la production virale est attribuée à une physiologie cellulaire optimisée qui favorise une absorption efficace des plasmides, une forte expression des transgènes et un assemblage et une libération efficaces des particules lentivirales incapables de se répliquer lorsqu'elles sont co-transfectées avec des constructions d'encapsidation et d'enveloppe appropriées. Les cellules Lenti-X293T sont donc largement utilisées pour la génération de vecteurs lentiviraux de troisième génération dans les applications de délivrance de gènes, d'édition de gènes et d'ingénierie de lignées cellulaires stables.

Les cellules Lenti-X293T conservent l'utilité générale des systèmes dérivés de HEK293 pour l'expression de protéines recombinantes à haut niveau et les études d'expression génique transitoire. Leurs caractéristiques de croissance stable et leurs performances reproductibles les rendent adaptées à la fois aux applications de recherche à petite échelle et aux environnements de production évolutifs, à condition que les directives standard en matière de biosécurité et d'encapsidation des vecteurs soient respectées pour les systèmes lentiviraux.

Tissu
Rein embryonnaire
Maladie
Lignée cellulaire transformée (cellules HEK transformées par l'ADN de l'adénovirus de type 5)
Applications
Production de vecteurs lentiviraux ; transfection transitoire ; expression de protéines recombinantes à haut niveau ; conditionnement viral
Synonymes
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
OGM
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Niveau de biosécurité
2

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Cellules épithéliales rénales embryonnaires
Tumorigène
tumorigène chez les souris immunodéprimées (pour 293T)
Statut de ploïdie
Anéuploïde, hypotriploïde (signalé pour 293T)
Caryotype
Caryotype humain aneuploïde présentant de multiples anomalies chromosomiques (typique pour 293T)
Temps de doublement
20 à 24 heures

04Identifiants

Référence
Lenti-X293T (référence Cytion 305820)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
Antigène T large du SV40
Expression des antigènes
Antigène T large du SV40
Oncogènes
Antigène T large du SV40
Profil mutationnel
Non entièrement caractérisé ; contient de l'ADN intégré d'adénovirus 5 et une construction d'antigène T grand SV40.
Virus
Contient l'ADN de l'adénovirus de type 5 ; exprime l'antigène T grand de SV40.
Sensibilité aux virus
Très permissif pour la production de lentivirus

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Diviser avant d'atteindre la confluence complète ; laisser jusqu'à 48 heures pour une fixation complète après décongélation.
Rapport de fractionnement
Un rapport de 1:5 à 1:10 est recommandé.
Densité de semis
2 à 4 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
Tous les 2-3 jours
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Contrôle qualité et cryoconservation

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Fœtus