
- Tissu
- Rein embryonnaire
- Maladie
- Lignée cellulaire transformée (cellules HEK transformées par l'ADN de l'adénovirus de type 5)
- Synonymes
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Documents
Lenti-X293T
Cell line · Référence du produit 305820
Les cellules Lenti-X293T sont issues de la lignée rénale embryonnaire humaine 293T ; elles ont été modifiées et optimisées spécifiquement pour l'utilisation de vecteurs lentiviraux à haut rendement...
Personnalisation / Recommandations
- Lenti-X293TCell line€550.00
Recommandé (lot le plus récent)
01Informations générales
- Description
Les cellules Lenti-X293T sont un dérivé de la lignée rénale embryonnaire humaine 293T, conçues et optimisées spécifiquement pour la production de vecteurs lentiviraux à haut rendement. À l'instar des cellules parentales 293T, elles expriment de manière stable l'antigène T grand SV40, qui permet la réplication épisomale des plasmides contenant l'origine de réplication SV40 et améliore considérablement l'efficacité de la transfection transitoire. Les cellules Lenti-X293T présentent une morphologie épithéliale adhérente et des caractéristiques de croissance robustes dans des conditions de culture standard supplémentées en sérum, ce qui permet des cultures à haute densité adaptées aux flux de travail de production virale à grande échelle.
Cette lignée cellulaire a été sélectionnée pour ses performances de transfection supérieures à l'aide de réactifs à base de phosphate de calcium, de lipides ou de polymères, ce qui se traduit par des titres lentiviraux constamment élevés par rapport aux populations HEK293T conventionnelles. L'augmentation de la production virale est attribuée à une physiologie cellulaire optimisée qui favorise une absorption efficace des plasmides, une forte expression des transgènes et un assemblage et une libération efficaces des particules lentivirales incapables de se répliquer lorsqu'elles sont co-transfectées avec des constructions d'encapsidation et d'enveloppe appropriées. Les cellules Lenti-X293T sont donc largement utilisées pour la génération de vecteurs lentiviraux de troisième génération dans les applications de délivrance de gènes, d'édition de gènes et d'ingénierie de lignées cellulaires stables.
Les cellules Lenti-X293T conservent l'utilité générale des systèmes dérivés de HEK293 pour l'expression de protéines recombinantes à haut niveau et les études d'expression génique transitoire. Leurs caractéristiques de croissance stable et leurs performances reproductibles les rendent adaptées à la fois aux applications de recherche à petite échelle et aux environnements de production évolutifs, à condition que les directives standard en matière de biosécurité et d'encapsidation des vecteurs soient respectées pour les systèmes lentiviraux.
- Tissu
- Rein embryonnaire
- Maladie
- Lignée cellulaire transformée (cellules HEK transformées par l'ADN de l'adénovirus de type 5)
- Applications
- Production de vecteurs lentiviraux ; transfection transitoire ; expression de protéines recombinantes à haut niveau ; conditionnement viral
- Synonymes
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Classification
- Organisme
- Humain
- Sexe
- Femme
- Propriétés de croissance
- Adepte
- Statut OGM
- OGM
- Informations détaillées sur le statut OGM
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Niveau de biosécurité
- 2
03Caractéristiques
- Morphologie
- De type épithélial
- Type de cellule
- Cellules épithéliales rénales embryonnaires
- Tumorigène
- tumorigène chez les souris immunodéprimées (pour 293T)
- Statut de ploïdie
- Anéuploïde, hypotriploïde (signalé pour 293T)
- Caryotype
- Caryotype humain aneuploïde présentant de multiples anomalies chromosomiques (typique pour 293T)
- Temps de doublement
- 20 à 24 heures
04Identifiants
- Référence
- Lenti-X293T (référence Cytion 305820)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Expression et sensibilité
- Expression des protéines
- Antigène T large du SV40
- Expression des antigènes
- Antigène T large du SV40
- Oncogènes
- Antigène T large du SV40
- Profil mutationnel
- Non entièrement caractérisé ; contient de l'ADN intégré d'adénovirus 5 et une construction d'antigène T grand SV40.
- Virus
- Contient l'ADN de l'adénovirus de type 5 ; exprime l'antigène T grand de SV40.
- Sensibilité aux virus
- Très permissif pour la production de lentivirus
06Manipulation et culture
- Milieu de culture
- DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10% de FBS
- Réactif de dissociation
- Accutase
- Repiquage
- Diviser avant d'atteindre la confluence complète ; laisser jusqu'à 48 heures pour une fixation complète après décongélation.
- Rapport de fractionnement
- Un rapport de 1:5 à 1:10 est recommandé.
- Densité de semis
- 2 à 4 x 104 cellules/cm2
- Renouvellement des fluides
- Tous les 2-3 jours
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Contrôle qualité et cryoconservation
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donateur
- Âge du donneur
- Fœtus
09Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Un accord de transfert de matériel est requis
- Oui