Ga naar de inhoud
Lenti-X293T
Weefsel
Embryonale nier
Ziekte
Getransformeerde cellijn (adenovirus type 5 DNA-getransformeerde HEK-cellen)
Synoniemen
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Documenten

Lenti-X293T

Cell line · Productnummer 305820

Lenti-X293T-cellen zijn afgeleid van de menselijke embryonale niercelijn 293T en zijn specifiek ontwikkeld en geoptimaliseerd voor hoogrendementse lentivirale vectoren...

€550.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

Lenti-X293T-cellen zijn een derivaat van de menselijke embryonale nier 293T-lijn, speciaal ontwikkeld en geoptimaliseerd voor de productie van zeer efficiënte lentivirale vectoren. Net als de oorspronkelijke 293T-cellen brengen ze op stabiele wijze het SV40 large T-antigeen tot expressie, wat episomale replicatie van plasmiden met de SV40-replicatie-oorsprong mogelijk maakt en de efficiëntie van tijdelijke transfectie aanzienlijk verbetert. Lenti-X293T-cellen vertonen een hechtende epitheliale morfologie en robuuste groeikenmerken in standaard kweekomstandigheden met serumtoevoeging, waardoor ze geschikt zijn voor kweek met hoge dichtheid voor grootschalige virale productieprocessen.

Deze cellijn is geselecteerd vanwege zijn superieure transfectieprestaties bij gebruik van calciumfosfaat, op lipiden of polymeren gebaseerde reagentia, wat resulteert in consistent verhoogde lentivirale titers in vergelijking met conventionele HEK293T-populaties. De verbeterde virale output wordt toegeschreven aan een geoptimaliseerde cellulaire fysiologie die efficiënte plasmideopname, sterke transgenexpressie en effectieve assemblage en afgifte van replicatie-incompetente lentivirale deeltjes ondersteunt bij co-transfectie met geschikte verpakkings- en envelopconstructies. Lenti-X293T-cellen worden daarom veel gebruikt voor het genereren van derde generatie lentivirale vectoren in toepassingen voor genafgifte, genbewerking en stabiele cellijnengineering.

Lenti-X293T-cellen behouden het algemene nut van HEK293-afgeleide systemen voor hoogwaardige recombinante eiwitexpressie en tijdelijke genexpressiestudies. Door hun stabiele groeikenmerken en reproduceerbare prestaties zijn ze geschikt voor zowel kleinschalige onderzoekstoepassingen als schaalbare productieomgevingen, mits de standaardrichtlijnen voor bioveiligheid en vectorverpakking voor lentivirale systemen worden gevolgd.

Weefsel
Embryonale nier
Ziekte
Getransformeerde cellijn (adenovirus type 5 DNA-getransformeerde HEK-cellen)
Toepassingen
Productie van lentivirale vectoren; tijdelijke transfectie; expressie van recombinant eiwit op hoog niveau; virusverpakking
Synoniemen
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GGO
Details over de GGO-status
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Embryonale nierenepitheelcellen
Tumorverwekkend
tumorigeen bij immuungecompromitteerde muizen (voor 293T)
Ploïdie
Aneuploïde, hypotriploïde (gerapporteerd voor 293T)
Karyotype
Aneuploïde menselijke karyotype met meerdere chromosomale afwijkingen (typisch voor 293T)
Verdubbelingstijd
20-24 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Lenti-X293T (Cytion-catalogusnummer 305820)
NCBI-belastingnummer
9606

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
SV40 groot T-antigeen
Antigeenexpressie
SV40 groot T-antigeen
Oncogenen
SV40 groot T-antigeen
Mutatieprofiel
Niet volledig gekarakteriseerd; bevat geïntegreerd adenovirus 5-DNA en SV40 groot T-antigeenconstruct.
Virussen
Bevat adenovirus type 5 DNA; brengt SV40 groot T-antigeen tot expressie.
Gevoeligheid voor virussen
Zeer tolerant voor de productie van lentivirussen

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Splitsen voordat volledige samenvloeiing is bereikt; na ontdooien maximaal 48 uur wachten voor volledige hechting.
Splitsingsverhouding
Een verhouding van 1:5 tot 1:10 wordt aanbevolen.
Zaaidichtheid
2 tot 4 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
Om de 2-3 dagen
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Foetus