Prejsť na obsah
Lenti-X293T
Tkanivo
Embryonálna oblička
Choroba
Transformovaná bunková línia (adenovírus typu 5 DNA-transformované HEK bunky)
Synonymá
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Dokumenty

Lenti-X293T

Cell line · Číslo výrobku 305820

Bunky Lenti-X293T sú derivátom línie ľudských embryonálnych obličkových buniek 293T, ktoré boli špeciálne vyvinuté a optimalizované pre vysokoúčinný lentivírusový vektor...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky Lenti-X293T sú derivátom línie ľudských embryonálnych obličiek 293T, ktoré boli špeciálne navrhnuté a optimalizované pre vysoko efektívnu produkciu lentivírusových vektorov. Podobne ako rodičovské bunky 293T, stabilne exprimujú veľký T antigén SV40, ktorý umožňuje epizómovú replikáciu plazmídov obsahujúcich replikačný pôvod SV40 a výrazne zvyšuje efektívnosť prechodnej transfekcie. Bunky Lenti-X293T vykazujú adhezívnu epiteliálnu morfológiu a robustné rastové charakteristiky v štandardných kultivačných podmienkach s prídavkom séra, čo podporuje kultúry s vysokou hustotou vhodné pre veľkoplošné pracovné postupy výroby vírusov.

Táto bunková línia bola vybraná pre vynikajúcu transfekčnú výkonnosť pri použití fosforečnanu vápenatého, lipidových alebo polymérnych reagencií, čo vedie k konzistentne zvýšeným titrom lentivírusov v porovnaní s konvenčnými populáciami HEK293T. Zvýšená vírusová produkcia sa pripisuje optimalizovanej bunkovej fyziológii, ktorá podporuje efektívne vstrebávanie plazmidov, silnú expresiu transgenov a efektívne zostavovanie a uvoľňovanie replikačne nekompetentných lentivírusových častíc pri ko-transfekcii s vhodnými baliacimi a obalovými konštrukciami. Bunky Lenti-X293T sa preto široko používajú na generovanie lentivírusových vektorov tretej generácie v aplikáciách na dodávanie génov, úpravu génov a inžinierstvo stabilných bunkových línií.

Bunky Lenti-X293T zachovávajú všeobecnú použiteľnosť systémov odvodených od HEK293 pre expresiu rekombinantných proteínov na vysokej úrovni a štúdie prechodnej génovej expresie. Vďaka svojim stabilným rastovým charakteristikám a reprodukovateľnému výkonu sú vhodné ako pre malé výskumné aplikácie, tak aj pre škálovateľné výrobné prostredia, za predpokladu, že sa dodržiavajú štandardné pokyny pre biologickú bezpečnosť a balenie vektorov pre lentivírusové systémy.

Tkanivo
Embryonálna oblička
Choroba
Transformovaná bunková línia (adenovírus typu 5 DNA-transformované HEK bunky)
Aplikácie
Produkcia lentivírusového vektora; prechodná transfekcia; expresia rekombinantného proteínu na vysokej úrovni; balenie vírusu
Synonymá
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Embryonálne epiteliálne bunky obličiek
Tumorigenický
tumorigénny u imunokompromitovaných myší (pre 293T)
Ploidný stav
Aneuploidný, hypotriploidný (hlásené pre 293T)
Karyotyp
Aneuploidný ľudský karyotyp s viacerými chromozómovými abnormalitami (typický pre 293T)
Doba zdvojnásobenia
20–24 hodín

04Identifikátory

Citácia
Lenti-X293T (číslo katalógu Cytion 305820)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
SV40 veľký T antigén
Expresia antigénu
SV40 veľký T antigén
Onkogény
SV40 veľký T antigén
Mutčný profil
Nie je úplne charakterizovaný; obsahuje integrovanú DNA adenovírusu 5 a konštrukt veľkého T antigénu SV40.
Vírusy
Obsahuje DNA adenovírusu typu 5; exprimuje veľký T antigén SV40.
Náchylnosť na vírusy
Vysoko tolerantný pre produkciu lentivírusov

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Rozdeľte pred dosiahnutím úplného zlúčenia; po rozmrazení počkajte až 48 hodín, kým sa úplne pripojí.
Pomer rozdelenia
Odporúča sa pomer 1:5 až 1:10.
Hustota výsevu
2 až 4 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
Každé 2–3 dni
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Plod