
- Tkanivo
- Embryonálna oblička
- Choroba
- Transformovaná bunková línia (adenovírus typu 5 DNA-transformované HEK bunky)
- Synonymá
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Dokumenty
Lenti-X293T
Cell line · Číslo výrobku 305820
Bunky Lenti-X293T sú derivátom línie ľudských embryonálnych obličkových buniek 293T, ktoré boli špeciálne vyvinuté a optimalizované pre vysokoúčinný lentivírusový vektor...
Prispôsobenie / Odporúčania
- Lenti-X293TCell line€550.00
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
01Všeobecné informácie
- Popis
Bunky Lenti-X293T sú derivátom línie ľudských embryonálnych obličiek 293T, ktoré boli špeciálne navrhnuté a optimalizované pre vysoko efektívnu produkciu lentivírusových vektorov. Podobne ako rodičovské bunky 293T, stabilne exprimujú veľký T antigén SV40, ktorý umožňuje epizómovú replikáciu plazmídov obsahujúcich replikačný pôvod SV40 a výrazne zvyšuje efektívnosť prechodnej transfekcie. Bunky Lenti-X293T vykazujú adhezívnu epiteliálnu morfológiu a robustné rastové charakteristiky v štandardných kultivačných podmienkach s prídavkom séra, čo podporuje kultúry s vysokou hustotou vhodné pre veľkoplošné pracovné postupy výroby vírusov.
Táto bunková línia bola vybraná pre vynikajúcu transfekčnú výkonnosť pri použití fosforečnanu vápenatého, lipidových alebo polymérnych reagencií, čo vedie k konzistentne zvýšeným titrom lentivírusov v porovnaní s konvenčnými populáciami HEK293T. Zvýšená vírusová produkcia sa pripisuje optimalizovanej bunkovej fyziológii, ktorá podporuje efektívne vstrebávanie plazmidov, silnú expresiu transgenov a efektívne zostavovanie a uvoľňovanie replikačne nekompetentných lentivírusových častíc pri ko-transfekcii s vhodnými baliacimi a obalovými konštrukciami. Bunky Lenti-X293T sa preto široko používajú na generovanie lentivírusových vektorov tretej generácie v aplikáciách na dodávanie génov, úpravu génov a inžinierstvo stabilných bunkových línií.
Bunky Lenti-X293T zachovávajú všeobecnú použiteľnosť systémov odvodených od HEK293 pre expresiu rekombinantných proteínov na vysokej úrovni a štúdie prechodnej génovej expresie. Vďaka svojim stabilným rastovým charakteristikám a reprodukovateľnému výkonu sú vhodné ako pre malé výskumné aplikácie, tak aj pre škálovateľné výrobné prostredia, za predpokladu, že sa dodržiavajú štandardné pokyny pre biologickú bezpečnosť a balenie vektorov pre lentivírusové systémy.
- Tkanivo
- Embryonálna oblička
- Choroba
- Transformovaná bunková línia (adenovírus typu 5 DNA-transformované HEK bunky)
- Aplikácie
- Produkcia lentivírusového vektora; prechodná transfekcia; expresia rekombinantného proteínu na vysokej úrovni; balenie vírusu
- Synonymá
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Klasifikácia
- Organizmus
- Človek
- Sex
- Žena
- Rastové vlastnosti
- Prívrženec
- Stav GMO
- GMO
- Podrobnosti o štatúte GMO
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 2
03Charakteristiky
- Morfológia
- Epitelu podobné
- Typ bunky
- Embryonálne epiteliálne bunky obličiek
- Tumorigenický
- tumorigénny u imunokompromitovaných myší (pre 293T)
- Ploidný stav
- Aneuploidný, hypotriploidný (hlásené pre 293T)
- Karyotyp
- Aneuploidný ľudský karyotyp s viacerými chromozómovými abnormalitami (typický pre 293T)
- Doba zdvojnásobenia
- 20–24 hodín
04Identifikátory
- Citácia
- Lenti-X293T (číslo katalógu Cytion 305820)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Prejav a náchylnosť
- Expresia proteínov
- SV40 veľký T antigén
- Expresia antigénu
- SV40 veľký T antigén
- Onkogény
- SV40 veľký T antigén
- Mutčný profil
- Nie je úplne charakterizovaný; obsahuje integrovanú DNA adenovírusu 5 a konštrukt veľkého T antigénu SV40.
- Vírusy
- Obsahuje DNA adenovírusu typu 5; exprimuje veľký T antigén SV40.
- Náchylnosť na vírusy
- Vysoko tolerantný pre produkciu lentivírusov
06Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10 % FBS
- Disociačné činidlo
- Accutase
- Rozmnožovanie kultúr
- Rozdeľte pred dosiahnutím úplného zlúčenia; po rozmrazení počkajte až 48 hodín, kým sa úplne pripojí.
- Pomer rozdelenia
- Odporúča sa pomer 1:5 až 1:10.
- Hustota výsevu
- 2 až 4 x 104 buniek/cm2
- Obnova kvapaliny
- Každé 2–3 dni
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Mrazové médium
- Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
08Darca
- Vek darcu
- Plod
09Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Je potrebná dohoda o prenose materiálu
- Áno