Tartalomra ugrás
Lenti-X293T
Szövet
Embrionális vese
Betegség
Transzformált sejtvonal (adenovírus 5-ös típusú DNS-sel transzformált HEK sejtek)
Szinonimák
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Dokumentumok

Lenti-X293T

Cell line · Termékszám 305820

A Lenti-X293T sejtek az emberi embrionális vese 293T sejtvonalból származnak, és kifejezetten a nagy hatékonyságú lentivirális vektorokhoz lettek kifejlesztve és optimalizálva...

€550.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A Lenti-X293T sejtek az emberi embrionális vese 293T vonalból származnak, és kifejezetten a nagy hatékonyságú lentivírus vektorok előállítására lettek kifejlesztve és optimalizálva. Az anyasejtekhez hasonlóan stabilan expresszálják az SV40 nagy T antigént, amely lehetővé teszi az SV40 replikációs origót tartalmazó plazmidok episzomális replikációját, és jelentősen növeli az átmeneti transzfekció hatékonyságát. A Lenti-X293T sejtek adhezív epiteliális morfológiát és robusztus növekedési jellemzőket mutatnak standard szérummal kiegészített tenyésztési körülmények között, ami nagy sűrűségű tenyészeteket tesz lehetővé, amelyek alkalmasak nagyméretű vírusgyártási munkafolyamatokhoz.

Ezt a sejtvonalat kiváló transzfekciós teljesítménye miatt választották ki kalcium-foszfát, lipid- vagy polimer-alapú reagensek használatával, ami a hagyományos HEK293T populációkhoz képest következetesen magasabb lentivírus-titereket eredményez. A fokozott vírustermelés az optimalizált sejtfiziológiának köszönhető, amely támogatja a hatékony plazmidfelvételt, az erős transzgén expressziót, valamint a replikációra képtelen lentivírus részecskék hatékony összeszerelését és felszabadítását, amikor megfelelő csomagoló- és burkolókonstrukciókkal együtt transzfektálják őket. A Lenti-X293T sejteket ezért széles körben használják harmadik generációs lentivírus vektorok előállítására génbejuttatás, génszerkesztés és stabil sejtvonal-módosítási alkalmazásokban.

A Lenti-X293T sejtek megőrzik a HEK293-ból származó rendszerek általános hasznosságát a magas szintű rekombináns fehérje expresszió és az átmeneti gén expresszió vizsgálatokhoz. Stabil növekedési jellemzőik és reprodukálható teljesítményük alkalmassá teszi őket mind kis léptékű kutatási alkalmazásokhoz, mind skálázható termelési környezethez, feltéve, hogy a lentivirális rendszerekre vonatkozó standard biológiai biztonsági és vektorcsomagolási irányelveket betartják.

Szövet
Embrionális vese
Betegség
Transzformált sejtvonal (adenovírus 5-ös típusú DNS-sel transzformált HEK sejtek)
Alkalmazások
Lentivirális vektor előállítása; átmeneti transzfekció; magas szintű rekombináns fehérje expresszió; víruscsomagolás
Szinonimák
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Embrionális veseepiteliális sejtek
Daganatképző
tumorigenikus immunhiányos egerekben (293T esetében)
Ploidiaállapot
Aneuploid, hipotriploid (293T esetében jelentették)
Kariotípus
Aneuploid humán kariotípus többszörös kromoszóma rendellenességgel (jellemző a 293T-re)
Kettőzési idő
20-24 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
Lenti-X293T (Cytion katalógusszám: 305820)
NCBI adóazonosító szám
9606

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
SV40 nagy T antigén
Antigén-expresszió
SV40 nagy T antigén
Onkogének
SV40 nagy T antigén
Mutációs profil
Nem teljesen jellemzett; integrált adenovírus 5 DNS-t és SV40 nagy T antigén konstrukciót tartalmaz.
Vírusok
5-ös típusú adenovírus DNS-t tartalmaz; SV40 nagy T antigént expresszál
Vírusérzékenység
Nagyon engedékeny a lentivírus-termelés szempontjából

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Teljes összefolyás előtt osztja szét; a felolvasztás után várjon legfeljebb 48 órát a teljes rögzülésig.
Osztási arány
1:5 és 1:10 közötti arány ajánlott.
Ültetési sűrűség
2–4 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
2-3 naponta
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Magzat