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Lenti-X293T
Tissue
Rein embryonnaire
Disease
Lignée cellulaire transformée (cellules HEK transformées par l’ADN de l’adénovirus de type 5)
Synonyms
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Documents

Lenti-X293T

Cell line · Product number 305820

Lenti-X293T cells are a derivative of the human embryonic kidney 293T lineage, engineered and optimized specifically for high-efficiency lentiviral vector...

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Les cellules Lenti-X293T sont dérivées de la lignée 293T de reins embryonnaires humains; elles ont été modifiées génétiquement et optimisées spécifiquement pour la production hautement efficace de vecteurs lentiviraux. Tout comme les cellules 293T parentales, elles expriment de manière stable l’antigène T de grande taille du SV40, ce qui permet la réplication épisomale des plasmides contenant l’origine de réplication du SV40 et améliore considérablement l’efficacité de la transfection transitoire. Les cellules Lenti-X293T présentent une morphologie épithéliale adhérente et des caractéristiques de croissance robustes dans des conditions de culture standard enrichies en sérum, ce qui permet des cultures à haute densité adaptées aux processus de production virale à grande échelle.

Cette lignée cellulaire a été sélectionnée pour ses performances de transfection supérieures avec des réactifs à base de phosphate de calcium, de lipides ou de polymères, ce qui se traduit par des titres lentiviraux systématiquement plus élevés que ceux des populations HEK293T conventionnelles. Ce rendement viral accru est attribué à une physiologie cellulaire optimisée qui favorise une prise en charge efficace des plasmides, une forte expression du transgène, ainsi que l’assemblage et la libération efficaces de particules lentivirales incapables de se répliquer lorsqu’elles sont co-transfectées avec des constructions d’encapsidation et d’enveloppe appropriées. Les cellules Lenti-X293T sont donc largement utilisées pour la production de vecteurs lentiviraux de troisième génération dans des applications de transfert de gènes, d’édition génétique et d’ingénierie de lignées cellulaires stables.

Les cellules Lenti-X293T conservent l’utilité générale des systèmes dérivés des cellules HEK293 pour l’expression à haut niveau de protéines recombinantes et les études d’expression génique transitoire. Leurs caractéristiques de croissance stable et leurs performances reproductibles les rendent adaptées tant aux applications de recherche à petite échelle qu’aux environnements de production évolutifs, à condition que les lignes directrices standard en matière de biosécurité et d’encapsidation des vecteurs soient respectées pour les systèmes lentiviraux.

Tissue
Rein embryonnaire
Disease
Lignée cellulaire transformée (cellules HEK transformées par l’ADN de l’adénovirus de type 5)
Applications
Production de vecteurs lentiviraux; transfection transitoire; expression à haut niveau de protéines recombinantes; encapsidation virale
Synonyms
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO
GMO status details
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Cell type
Cellules épithéliales rénales embryonnaires
Tumourigenic
tumorigène chez les souris immunodéprimées (pour la lignée 293T)
Ploidy status
Aneuploïde, hypotriploïde (signalé pour la souche 293T)
Karyotype
Caryotype humain aneuploïde présentant de multiples anomalies chromosomiques (caractéristiques de la lignée 293T)
Doubling time
20 à 24 heures

04Identifiers

Citation
Lenti-X293T (numéro de catalogue Cytion 305820)
NCBI TaxID
9606

05Expression and susceptibility

Protein expression
Antigène T de grande taille du SV40
Antigen expression
Antigène T de grande taille du SV40
Oncogenes
Antigène T de grande taille du SV40
Mutational profile
N’a pas été entièrement caractérisé; contient de l’ADN intégré de l’adénovirus 5 et une construction de l’antigène T majeur du SV40
Viruses
Contient de l'ADN de l'adénovirus de type 5; exprime l'antigène T majeur du SV40
Virus susceptibility
Très favorable à la production de lentivirus

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Divisez la culture avant qu’elle n’atteigne la confluence complète; prévoyez jusqu’à 48 h pour que les cellules adhèrent complètement après la décongélation
Split ratio
On recommande un rapport de 1:5 à 1:10.
Seeding density
de 2 à 4 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
Tous les 2 ou 3 jours
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
Fœtus