
- Tissue
- Rein embryonnaire
- Disease
- Lignée cellulaire transformée (cellules HEK transformées par l’ADN de l’adénovirus de type 5)
- Synonyms
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Documents
Lenti-X293T
Cell line · Product number 305820
Lenti-X293T cells are a derivative of the human embryonic kidney 293T lineage, engineered and optimized specifically for high-efficiency lentiviral vector...
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01General information
- Description
Les cellules Lenti-X293T sont dérivées de la lignée 293T de reins embryonnaires humains; elles ont été modifiées génétiquement et optimisées spécifiquement pour la production hautement efficace de vecteurs lentiviraux. Tout comme les cellules 293T parentales, elles expriment de manière stable l’antigène T de grande taille du SV40, ce qui permet la réplication épisomale des plasmides contenant l’origine de réplication du SV40 et améliore considérablement l’efficacité de la transfection transitoire. Les cellules Lenti-X293T présentent une morphologie épithéliale adhérente et des caractéristiques de croissance robustes dans des conditions de culture standard enrichies en sérum, ce qui permet des cultures à haute densité adaptées aux processus de production virale à grande échelle.
Cette lignée cellulaire a été sélectionnée pour ses performances de transfection supérieures avec des réactifs à base de phosphate de calcium, de lipides ou de polymères, ce qui se traduit par des titres lentiviraux systématiquement plus élevés que ceux des populations HEK293T conventionnelles. Ce rendement viral accru est attribué à une physiologie cellulaire optimisée qui favorise une prise en charge efficace des plasmides, une forte expression du transgène, ainsi que l’assemblage et la libération efficaces de particules lentivirales incapables de se répliquer lorsqu’elles sont co-transfectées avec des constructions d’encapsidation et d’enveloppe appropriées. Les cellules Lenti-X293T sont donc largement utilisées pour la production de vecteurs lentiviraux de troisième génération dans des applications de transfert de gènes, d’édition génétique et d’ingénierie de lignées cellulaires stables.
Les cellules Lenti-X293T conservent l’utilité générale des systèmes dérivés des cellules HEK293 pour l’expression à haut niveau de protéines recombinantes et les études d’expression génique transitoire. Leurs caractéristiques de croissance stable et leurs performances reproductibles les rendent adaptées tant aux applications de recherche à petite échelle qu’aux environnements de production évolutifs, à condition que les lignes directrices standard en matière de biosécurité et d’encapsidation des vecteurs soient respectées pour les systèmes lentiviraux.
- Tissue
- Rein embryonnaire
- Disease
- Lignée cellulaire transformée (cellules HEK transformées par l’ADN de l’adénovirus de type 5)
- Applications
- Production de vecteurs lentiviraux; transfection transitoire; expression à haut niveau de protéines recombinantes; encapsidation virale
- Synonyms
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO
- GMO status details
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial
- Cell type
- Cellules épithéliales rénales embryonnaires
- Tumourigenic
- tumorigène chez les souris immunodéprimées (pour la lignée 293T)
- Ploidy status
- Aneuploïde, hypotriploïde (signalé pour la souche 293T)
- Karyotype
- Caryotype humain aneuploïde présentant de multiples anomalies chromosomiques (caractéristiques de la lignée 293T)
- Doubling time
- 20 à 24 heures
04Identifiers
- Citation
- Lenti-X293T (numéro de catalogue Cytion 305820)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Antigène T de grande taille du SV40
- Antigen expression
- Antigène T de grande taille du SV40
- Oncogenes
- Antigène T de grande taille du SV40
- Mutational profile
- N’a pas été entièrement caractérisé; contient de l’ADN intégré de l’adénovirus 5 et une construction de l’antigène T majeur du SV40
- Viruses
- Contient de l'ADN de l'adénovirus de type 5; exprime l'antigène T majeur du SV40
- Virus susceptibility
- Très favorable à la production de lentivirus
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Divisez la culture avant qu’elle n’atteigne la confluence complète; prévoyez jusqu’à 48 h pour que les cellules adhèrent complètement après la décongélation
- Split ratio
- On recommande un rapport de 1:5 à 1:10.
- Seeding density
- de 2 à 4 × 10⁴ cellules/cm²
- Fluid renewal
- Tous les 2 ou 3 jours
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- Fœtus
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes