
- Tisu
- Ginjal embrionik
- Penyakit
- Baris sel yang dimodifikasi (sel HEK yang dimodifikasi dengan DNA adenovirus tipe 5)
- Sinonim
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Dokumen
Lenti-X293T
Cell line · Nomor produk 305820
Sel Lenti-X293T merupakan turunan dari garis sel ginjal embrio manusia 293T, yang direkayasa dan dioptimalkan secara khusus untuk vektor lentiviral berefisiensi tinggi...
Penyesuaian / Rekomendasi
- Lenti-X293TCell line€550.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
Sel Lenti-X293T merupakan turunan dari garis sel ginjal embrio manusia 293T, yang dirancang dan dioptimalkan secara khusus untuk produksi vektor lentivirus ber efisiensi tinggi. Seperti sel induk 293T, sel ini secara stabil mengekspresikan antigen T besar SV40, yang memungkinkan replikasi episomal plasmid yang mengandung asal replikasi SV40 dan secara signifikan meningkatkan efisiensi transfeksi sementara. Sel Lenti-X293T menunjukkan morfologi epitel yang melekat dan karakteristik pertumbuhan yang kuat dalam kondisi kultur standar yang diperkaya serum, mendukung kultur padat yang cocok untuk alur kerja produksi virus skala besar.
Baris sel ini telah dipilih karena kinerja transfeksi yang superior menggunakan reagen fosfat kalsium, lipid, atau polimer, menghasilkan titer lentivirus yang secara konsisten lebih tinggi dibandingkan populasi HEK293T konvensional. Peningkatan output virus dikaitkan dengan fisiologi sel yang dioptimalkan, yang mendukung penyerapan plasmid yang efisien, ekspresi transgen yang kuat, serta perakitan dan pelepasan partikel lentivirus yang tidak mampu bereplikasi secara efektif saat dikofeksikan dengan konstruksi kemasan dan selubung yang sesuai. Sel Lenti-X293T oleh karena itu secara luas digunakan untuk generasi vektor lentivirus generasi ketiga dalam aplikasi pengiriman gen, pengeditan gen, dan rekayasa garis sel stabil.
Sel Lenti-X293T mempertahankan kegunaan umum sistem yang berasal dari HEK293 untuk ekspresi protein rekombinan tingkat tinggi dan studi ekspresi gen sementara. Karakteristik pertumbuhan stabil dan kinerja yang dapat diulang membuatnya cocok untuk aplikasi penelitian skala kecil maupun pengaturan produksi yang dapat diskalakan, asalkan pedoman keamanan biologis dan pengemasan vektor standar untuk sistem lentivirus diikuti.
- Tisu
- Ginjal embrionik
- Penyakit
- Baris sel yang dimodifikasi (sel HEK yang dimodifikasi dengan DNA adenovirus tipe 5)
- Aplikasi
- Produksi vektor lentivirus; transfeksi sementara; ekspresi protein rekombinan tingkat tinggi; pengemasan virus
- Sinonim
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Perempuan
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Status GMO
- GMO
- Rincian status GMO
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Tingkat keamanan hayati
- 2
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
- Jenis sel
- Sel epitel ginjal embrio
- Tumorigenik
- tumorigenik pada tikus dengan sistem kekebalan yang lemah (untuk 293T)
- Status ploidi
- Aneuploid, hipotriploid (dilaporkan untuk 293T)
- Kariotipe
- Kariotipe manusia aneuploid dengan kelainan kromosom multipel (khas untuk 293T)
- Waktu penggandaan
- 20-24 jam
04Pengidentifikasi
- Referensi
- Lenti-X293T (Nomor katalog Cytion 305820)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Ekspresi dan kerentanan
- Ekspresi protein
- Antigen T besar SV40
- Ekspresi antigen
- Antigen T besar SV40
- Onkogen
- Antigen T besar SV40
- Profil mutasi
- Belum sepenuhnya teridentifikasi; mengandung DNA adenovirus 5 yang terintegrasi dan konstruksi antigen T besar SV40.
- Virus
- Mengandung DNA adenovirus tipe 5; mengekspresikan antigen T besar SV40.
- Kerentanan terhadap virus
- Sangat memungkinkan untuk produksi lentivirus
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Tambahkan media dengan 10% FBS
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Pisahkan sebelum mencapai konfluensi penuh; biarkan hingga 48 jam untuk pengikatan penuh setelah pencairan.
- Rasio pemisahan
- Perbandingan 1:5 hingga 1:10 disarankan.
- Kepadatan penanaman
- 2 hingga 4 x 10⁴ sel/cm²
- Pergantian cairan
- Setiap 2-3 hari
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap + 10% DMSO untuk kelangsungan hidup pasca-pencairan yang memadai.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- Janin
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya