Pereiti prie turinio
Lenti-X293T
Audinys
Embrioninis inkstas
Liga
Transformuota ląstelių linija (adenoviruso 5 tipo DNR transformuotos HEK ląstelės)
Sinonimai
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Dokumentai

Lenti-X293T

Cell line · Prekės numeris 305820

„Lenti-X293T“ ląstelės yra žmogaus embrioninių inkstų 293T linijos atmaina, specialiai sukurta ir optimizuota siekiant užtikrinti didelio efektyvumo lentivirusinio vektoriaus...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Lenti-X293T ląstelės yra žmogaus embrioninių inkstų 293T linijos darinys, sukurtas ir optimizuotas specialiai didelio efektyvumo lentivirusinių vektorių gamybai. Kaip ir tėvinės 293T ląstelės, jos stabiliai ekspresuoja SV40 didelį T antigeną, kuris leidžia epizominę replikaciją plazmidų, turinčių SV40 replikacijos kilmę, ir žymiai padidina laikinos transfekcijos efektyvumą. Lenti-X293T ląstelės pasižymi adhezyvine epiteline morfologija ir stipriais augimo požymiais standartinėse kultūrinėse sąlygose su serumo priedais, todėl tinka didelio tankio kultūroms, kurios yra tinkamos didelio masto virusų gamybos procesams.

Ši ląstelių linija buvo atrinkta dėl puikios transfekcijos efektyvumo naudojant kalcio fosfato, lipidų arba polimerų pagrindu pagamintus reagentus, dėl to lentinio viruso titrai yra nuolat aukštesni, palyginti su įprastinėmis HEK293T populiacijomis. Padidėjęs virusų kiekis yra susijęs su optimizuota ląstelių fiziologija, kuri palaiko efektyvų plazmidų įsisavinimą, stiprią transgenų ekspresiją ir efektyvų replikacijai netinkamų lentivirusinių dalelių surinkimą ir išlaisvinimą, kai jos yra transfekuojamos kartu su atitinkamais pakavimo ir apvalkalo konstruktais. Todėl Lenti-X293T ląstelės yra plačiai naudojamos trečiosios kartos lentivirusinių vektorių generavimui genų perdavimo, genų redagavimo ir stabilių ląstelių linijų inžinerijos taikymuose.

Lenti-X293T ląstelės išlaiko bendrą HEK293 kilmės sistemų naudingumą aukšto lygio rekombinantinių baltymų ekspresijai ir laikiniems genų ekspresijos tyrimams. Dėl savo stabilių augimo charakteristikų ir atkuriamų savybių jos tinka tiek mažos apimties moksliniams tyrimams, tiek masto gamybai, su sąlyga, kad laikomasi standartinių biologinio saugumo ir vektorių pakavimo gairių, taikomų lentivirusinėms sistemoms.

Audinys
Embrioninis inkstas
Liga
Transformuota ląstelių linija (adenoviruso 5 tipo DNR transformuotos HEK ląstelės)
Paraiškos
Lentivirusinio vektoriaus gamyba; laikina transfekcija; aukšto lygio rekombinantinio baltymo ekspresija; viruso pakavimas
Sinonimai
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Embrioninės inkstų epitelio ląstelės
Tumorogeninis
tumorigeninis imuninės sistemos sutrikimų turinčiose pelėse (293T atveju)
Ploidijos būklė
Aneuploidinis, hipotriploidinis (pranešta apie 293T)
Kariotipas
Aneuploidinis žmogaus kariotipas su daugybe chromosomų anomalijų (būdingas 293T)
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
20–24 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
Lenti-X293T (Cytion katalogo numeris 305820)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
SV40 didelis T antigenas
Antigeno ekspresija
SV40 didelis T antigenas
Onkogenai
SV40 didelis T antigenas
Mutacijų profilis
Ne visiškai apibūdintas; sudėtyje yra integruotas adenoviruso 5 DNR ir SV40 didžiojo T antigeno konstruktas.
Virusai
Sudėtyje yra adenoviruso 5 tipo DNR; išreiškia SV40 didelį T antigeną.
Jautrumas virusams
Labai palankus lentivirusų gamybai

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Padalinkite prieš pasiekiant visišką susiliejimą; po atšildymo palaukite iki 48 valandų, kol visiškai prisijungs.
Skaidymo santykis
Rekomenduojamas santykis yra nuo 1:5 iki 1:10.
Sėjos tankis
2–4 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
Kas 2–3 dienas
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Vaisius