
- Tissue
- Rim embrionário
- Disease
- Linha celular transformada (células HEK transformadas com DNA do adenovírus tipo 5)
- Synonyms
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Documents
Lenti-X293T
Cell line · Product number 305820
Lenti-X293T cells are a derivative of the human embryonic kidney 293T lineage, engineered and optimized specifically for high-efficiency lentiviral vector...
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01General information
- Description
As células Lenti-X293T são um derivado da linhagem 293T de rim embrionário humano, modificadas geneticamente e otimizadas especificamente para a produção de vetores lentivirais de alta eficiência. Assim como as células 293T parentais, elas expressam de forma estável o antígeno T grande do SV40, o que permite a replicação episomal de plasmídeos contendo a origem de replicação do SV40 e aumenta significativamente a eficiência da transfecção transitória. As células Lenti-X293T apresentam uma morfologia epitelial aderente e características de crescimento robustas em condições padrão de cultura suplementadas com soro, permitindo culturas de alta densidade adequadas para fluxos de trabalho de produção viral em larga escala.
Essa linhagem celular foi selecionada por seu desempenho superior em transfecção com reagentes à base de fosfato de cálcio, lipídios ou polímeros, resultando em títulos lentivirais consistentemente elevados em comparação com populações convencionais de HEK293T. A produção viral aprimorada é atribuída à fisiologia celular otimizada, que favorece a captação eficiente de plasmídeos, a forte expressão do transgene e a montagem e liberação eficazes de partículas lentivirais incapazes de se replicar quando co-transfectadas com construções apropriadas de empacotamento e envelope. As células Lenti-X293T são, portanto, amplamente utilizadas para a geração de vetores lentivirais de terceira geração em aplicações de entrega de genes, edição genética e engenharia de linhagens celulares estáveis.
As células Lenti-X293T mantêm a utilidade geral dos sistemas derivados de HEK293 para a expressão de proteínas recombinantes em alto nível e estudos de expressão gênica transitória. Suas características de crescimento estável e desempenho reproduzível as tornam adequadas tanto para aplicações de pesquisa em pequena escala quanto para ambientes de produção escaláveis, desde que sejam seguidas as diretrizes padrão de biossegurança e empacotamento de vetores para sistemas lentivirais.
- Tissue
- Rim embrionário
- Disease
- Linha celular transformada (células HEK transformadas com DNA do adenovírus tipo 5)
- Applications
- Produção de vetores lentivirais; transfecção transitória; expressão de proteínas recombinantes em alto nível; empacotamento de vírus
- Synonyms
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO
- GMO status details
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Cell type
- Células epiteliais renais embrionárias
- Tumourigenic
- tumorigênico em camundongos imunocomprometidos (para 293T)
- Ploidy status
- Aneuploide, hipotriploide (relatado para a linhagem 293T)
- Karyotype
- Cariótipo humano aneuploide com múltiplas anomalias cromossômicas (típico da linha celular 293T)
- Doubling time
- 20 a 24 horas
04Identifiers
- Citation
- Lenti-X293T (número de catálogo da Cytion 305820)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Antígeno T grande do SV40
- Antigen expression
- Antígeno T grande do SV40
- Oncogenes
- Antígeno T grande do SV40
- Mutational profile
- Não totalmente caracterizado; contém DNA integrado do adenovírus 5 e uma construção do antígeno T grande do SV40
- Viruses
- Contém DNA do adenovírus tipo 5; expressa o antígeno T grande do SV40
- Virus susceptibility
- Altamente permissivo para a produção de lentivírus
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Divida antes de atingir a confluência total; aguarde até 48 horas para que as células se fixem completamente após o descongelamento
- Split ratio
- Recomenda-se uma proporção de 1:5 a 1:10.
- Seeding density
- 2 a 4 x 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- A cada 2 ou 3 dias
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- Feto
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes