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Lenti-X293T
Tissue
Rim embrionário
Disease
Linha celular transformada (células HEK transformadas com DNA do adenovírus tipo 5)
Synonyms
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

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Lenti-X293T

Cell line · Product number 305820

Lenti-X293T cells are a derivative of the human embryonic kidney 293T lineage, engineered and optimized specifically for high-efficiency lentiviral vector...

US$550.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

As células Lenti-X293T são um derivado da linhagem 293T de rim embrionário humano, modificadas geneticamente e otimizadas especificamente para a produção de vetores lentivirais de alta eficiência. Assim como as células 293T parentais, elas expressam de forma estável o antígeno T grande do SV40, o que permite a replicação episomal de plasmídeos contendo a origem de replicação do SV40 e aumenta significativamente a eficiência da transfecção transitória. As células Lenti-X293T apresentam uma morfologia epitelial aderente e características de crescimento robustas em condições padrão de cultura suplementadas com soro, permitindo culturas de alta densidade adequadas para fluxos de trabalho de produção viral em larga escala.

Essa linhagem celular foi selecionada por seu desempenho superior em transfecção com reagentes à base de fosfato de cálcio, lipídios ou polímeros, resultando em títulos lentivirais consistentemente elevados em comparação com populações convencionais de HEK293T. A produção viral aprimorada é atribuída à fisiologia celular otimizada, que favorece a captação eficiente de plasmídeos, a forte expressão do transgene e a montagem e liberação eficazes de partículas lentivirais incapazes de se replicar quando co-transfectadas com construções apropriadas de empacotamento e envelope. As células Lenti-X293T são, portanto, amplamente utilizadas para a geração de vetores lentivirais de terceira geração em aplicações de entrega de genes, edição genética e engenharia de linhagens celulares estáveis.

As células Lenti-X293T mantêm a utilidade geral dos sistemas derivados de HEK293 para a expressão de proteínas recombinantes em alto nível e estudos de expressão gênica transitória. Suas características de crescimento estável e desempenho reproduzível as tornam adequadas tanto para aplicações de pesquisa em pequena escala quanto para ambientes de produção escaláveis, desde que sejam seguidas as diretrizes padrão de biossegurança e empacotamento de vetores para sistemas lentivirais.

Tissue
Rim embrionário
Disease
Linha celular transformada (células HEK transformadas com DNA do adenovírus tipo 5)
Applications
Produção de vetores lentivirais; transfecção transitória; expressão de proteínas recombinantes em alto nível; empacotamento de vírus
Synonyms
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO
GMO status details
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Células epiteliais renais embrionárias
Tumourigenic
tumorigênico em camundongos imunocomprometidos (para 293T)
Ploidy status
Aneuploide, hipotriploide (relatado para a linhagem 293T)
Karyotype
Cariótipo humano aneuploide com múltiplas anomalias cromossômicas (típico da linha celular 293T)
Doubling time
20 a 24 horas

04Identifiers

Citation
Lenti-X293T (número de catálogo da Cytion 305820)
NCBI TaxID
9606

05Expression and susceptibility

Protein expression
Antígeno T grande do SV40
Antigen expression
Antígeno T grande do SV40
Oncogenes
Antígeno T grande do SV40
Mutational profile
Não totalmente caracterizado; contém DNA integrado do adenovírus 5 e uma construção do antígeno T grande do SV40
Viruses
Contém DNA do adenovírus tipo 5; expressa o antígeno T grande do SV40
Virus susceptibility
Altamente permissivo para a produção de lentivírus

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Divida antes de atingir a confluência total; aguarde até 48 horas para que as células se fixem completamente após o descongelamento
Split ratio
Recomenda-se uma proporção de 1:5 a 1:10.
Seeding density
2 a 4 x 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
A cada 2 ou 3 dias
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
Feto