
- Tissue
- 胚胎腎臟
- Disease
- 轉化細胞系(經第5型腺病毒DNA轉化的HEK細胞)
- Synonyms
- Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T
Documents
Lenti-X293T
Cell line · Product number 305820
Lenti-X293T cells are a derivative of the human embryonic kidney 293T lineage, engineered and optimized specifically for high-efficiency lentiviral vector...
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01General information
- Description
Lenti-X293T 細胞是源自人類胚胎腎臟 293T 細胞系的衍生細胞系,經特別工程化設計與優化,專用於高效生產慢病毒載體。 與親本 293T 細胞一樣,它們穩定表達 SV40 大 T 抗原,這使得含有 SV40 複製起始點的質體能夠進行環狀 DNA 複製,並顯著提高瞬時轉染效率。 Lenti-X293T 細胞在標準的含血清培養條件下,呈現黏附性上皮形態及強勁的生長特性,支援高密度培養,適合大規模病毒生產工作流程。
該細胞系因使用磷酸鈣、脂質基或聚合物基試劑時表現出卓越的轉染效能而被選中,與傳統的 HEK293T 細胞群相比,可持續產生更高的慢病毒滴度。 病毒產量的提升歸因於優化的細胞生理特性,該特性可支持高效的質體攝取、強烈的轉基因表達,以及在與適當的包裝和包膜構建體共轉染時,有效組裝和釋放無複製能力的慢病毒顆粒。 因此,Lenti-X293T 細胞廣泛應用於基因遞送、基因編輯及穩定細胞系工程等領域中,用於生成第三代慢病毒載體。
Lenti-X293T 細胞保留了源自 HEK293 系統的一般用途,可用於高水準的重組蛋白質表達及暫時性基因表達研究。 其穩定的生長特性與可重複的表現,使其既適用於小規模研究應用,也適用於可擴展的生產環境,前提是須遵循針對慢病毒系統制定的標準生物安全與載體包裝指南。
- Tissue
- 胚胎腎臟
- Disease
- 轉化細胞系(經第5型腺病毒DNA轉化的HEK細胞)
- Applications
- 慢病毒載體製備;瞬時轉染;高水準重組蛋白質表達;病毒包裝
- Synonyms
- Lenti-X 293T
- 293T
- HEK 293T
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO
- GMO status details
- GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Cell type
- 胚胎腎上皮細胞
- Tumourigenic
- 在免疫缺陷小鼠中具有致瘤性(針對 293T)
- Ploidy status
- 非整倍體、次三倍體(據報導見於 293T 細胞)
- Karyotype
- 具有多種染色體異常的人類非整倍體核型(293T 細胞的典型特徵)
- Doubling time
- 20至24小時
04Identifiers
- Citation
- Lenti-X293T(Cytion 型號 305820)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0063 (parental 293T)
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- SV40 大 T 抗原
- Antigen expression
- SV40 大 T 抗原
- Oncogenes
- SV40 大 T 抗原
- Mutational profile
- 尚未完全闡明其特性;含有整合型腺病毒 5 型 DNA 及 SV40 大 T 抗原構建體
- Viruses
- 含有第5型腺病毒DNA;可表達SV40大T抗原
- Virus susceptibility
- 對慢病毒生產具有高度容許性
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 在細胞完全融合前進行分培養;解凍後需等待最多 48 小時,以確保細胞完全附著
- Split ratio
- 建議的比例為 1:5 至 1:10。
- Seeding density
- 2 至 4 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Fluid renewal
- 每 2 至 3 天
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基加上 10% 的二甲基亞砜(DMSO),以確保解凍後的細胞存活率達到適當水準。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 胎兒
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes