Pāriet uz saturu
Lenti-X293T
Audums
Embrionālā niere
Slimība
Transformēta šūnu līnija (adenovīrusa 5. tipa DNS transformētas HEK šūnas)
Sinonīmi
Lenti-X 293T, 293T, HEK 293T

Dokumenti

Lenti-X293T

Cell line · Preces numurs 305820

Lenti-X293T šūnas ir cilvēka embrionālo nieru 293T šūnu līnijas atvasinājums, kas ir speciāli izstrādātas un optimizētas augstas efektivitātes lentivīrusu vektora...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Lenti-X293T šūnas ir cilvēka embrija nieru 293T cilts atvasinājums, kas ir īpaši izstrādāts un optimizēts augstas efektivitātes lentivīrusu vektoru ražošanai. Tāpat kā vecāku 293T šūnas, tās stabili ekspresē SV40 lielā T antigēnu, kas ļauj episomāli replicēt plazmīdas, kas satur SV40 replikācijas izcelsmi, un ievērojami uzlabo pārejošas transfekcijas efektivitāti. Lenti-X293T šūnas uzrāda adhezīvu epitēlija morfoloģiju un stabilas augšanas īpašības standarta seruma papildinātos kultivēšanas apstākļos, atbalstot augstas blīvuma kultūras, kas piemērotas liela mēroga vīrusu ražošanas darba plūsmām.

Šī šūnu līnija ir izvēlēta tās izcilajai transfekcijas veiktspējai, izmantojot kalcija fosfāta, lipīdu vai polimēru bāzes reaģentus, kā rezultātā tiek iegūti pastāvīgi paaugstināti lentivīrusu titri salīdzinājumā ar parastajām HEK293T populācijām. Uzlabotā vīrusu produkcija ir saistīta ar optimizētu šūnu fizioloģiju, kas nodrošina efektīvu plazmīdu uzsūkšanos, spēcīgu transgēnu ekspresiju un efektīvu replikācijas nespējīgu lentivīrusu daļiņu salikšanu un atbrīvošanu, ja tās tiek kopīgi transfekcijas ar atbilstošām iepakojuma un apvalka konstrukcijām. Tāpēc Lenti-X293T šūnas plaši izmanto trešās paaudzes lentivīrusu vektoru radīšanai gēnu piegādē, gēnu rediģēšanā un stabilu šūnu līniju inženierijas lietojumos.

Lenti-X293T šūnas saglabā HEK293 atvasināto sistēmu vispārējo lietderību augsta līmeņa rekombinantās proteīna ekspresijas un pārejošas gēnu ekspresijas pētījumos. To stabilās augšanas īpašības un reproducējama veiktspēja padara tās piemērotas gan mazā mēroga pētniecības lietojumiem, gan mērogojamām ražošanas vidēm, ja tiek ievērotas standarta bioloģiskās drošības un vektoru iepakošanas vadlīnijas lentivīrusu sistēmām.

Audums
Embrionālā niere
Slimība
Transformēta šūnu līnija (adenovīrusa 5. tipa DNS transformētas HEK šūnas)
Pieteikumi
Lentivīrusu vektoru ražošana; pārejoša transfekcija; augsta līmeņa rekombinantās proteīna ekspresija; vīrusu iepakošana
Sinonīmi
  • Lenti-X 293T
  • 293T
  • HEK 293T

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO Status Genetically modified (adenovirus type 5 DNA transformation; SV40 large T antigen expression)
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Embrionālo nieru epitēlija šūnas
Tumorogēns
tumorogēns imūndeficītiem pelēm (293T gadījumā)
Ploidijas statuss
Aneuploīds, hipotriploīds (ziņots par 293T)
Kariotips
Aneuploīds cilvēka kariotips ar vairākiem hromosomu anomālijām (tipisks 293T gadījumam)
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
20–24 stundas

04Identifikatori

Atsauce
Lenti-X293T (Cytion kataloga numurs 305820)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
SV40 lielais T antigēns
Antigēna ekspresija
SV40 lielais T antigēns
Onkogēni
SV40 lielais T antigēns
Mutāciju profils
Nav pilnībā raksturots; satur integrētu adenovīrusa 5 DNS un SV40 lielā T antigēna konstrukciju.
Vīrusi
Satur adenovīrusa 5. tipa DNS; izsaka SV40 lielā T antigēna
Jutība pret vīrusiem
Ļoti labvēlīgs lentivīrusu ražošanai

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Sadaliet pirms pilnīgas saplūšanas; pēc atkausēšanas ļaujiet līdz 48 stundām, lai notiktu pilnīga saistīšanās.
Sadalījuma attiecība
Ieteicamais attiecība ir no 1:5 līdz 1:10.
Sēšanas blīvums
2 līdz 4 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 2–3 dienām
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Auglis